【求助】PCR阴性又条带

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标题:【求助】PCR阴性又条带

hulu呼噜[使用道具]
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发表于 2015-1-13 16:34 资料个人空间短消息加为好友

小中大

各位大神，各种求助啊。最近做pcr老是阴性由条带，因为后续实验要连接载体，所以要保证前面的克隆是正确的。第一次阴性扩出条带之后，断断续续改变条件，阴性有时候有带，有时候没有。今天针对阴性又彻底做了一个排查，结果跑胶的结果让人崩溃啊！！！！
我先说下我改变的条件，水有两个1和2 都是用的新拿出来的MIX 引物有两对1和2 模板有两个1 和2 还有就是控制加不加矿物油了

其中后面两个是用了Taq酶做的。

水2是新拿的 MIX是新的

各位大神给点帮助啊！！！！在线求解答！！！！

45778[使用道具]
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发表于 2015-1-13 16:35 资料个人空间短消息加为好友

小中大

有污染了。

hulu呼噜[使用道具]
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发表于 2015-1-13 16:37 资料个人空间短消息加为好友

小中大

QUOTE:

原帖由 45778 于 2015-1-13 16:35 发表 bbcodeurl('http://bbs.antpedia.com/images/common/back.gif', '%s')

有污染了。

可是按说我几乎每个条件都改变了的啊难道说都污染了?

wiwi[使用道具]
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发表于 2015-1-13 16:37 资料个人空间短消息加为好友

小中大

我前几天也出现了相同的状况，后来发现是加样枪有污染（我引物的灵敏性较高），你可以尝试到其他实验室换别人的枪试一下

hulu呼噜[使用道具]
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发表于 2015-1-13 16:38 资料个人空间短消息加为好友

小中大

QUOTE:

原帖由 wiwi 于 2015-1-13 16:37 发表 bbcodeurl('http://bbs.antpedia.com/images/common/back.gif', '%s')

我前几天也出现了相同的状况，后来发现是加样枪有污染（我引物的灵敏性较高），你可以尝试到其他实验室换别人的枪试一下

但是加样的时候液体没有接触到枪啊，不过这方面倒是还没有注意到~~~下次再试试

wiwi[使用道具]
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发表于 2015-1-13 16:38 资料个人空间短消息加为好友

小中大

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原帖由 hulu呼噜 于 2015-1-13 16:38 发表 bbcodeurl('http://bbs.antpedia.com/images/common/back.gif', '%s')

但是加样的时候液体没有接触到枪啊，不过这方面倒是还没有注意到~~~下次再试试

我也是非常非常注意的加样了，但在自己实验室做总有条带，到别人实验室就没有，所有东西都用的别人的，嘻嘻

BUK[使用道具]
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