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标题:【求助】 PCR条带问题

ujne[使用道具]
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发表于 2015-1-14 11:12 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

【求助】 PCR条带问题

请大家帮我看下我的pcr条带 这是3种引物扩增出来的。左边是beta-actin,为什么那么宽而且模糊，请帮我分析下原因。之前都是按同样的体系做，并不像这个样子，是从前两天开始，到现在一直这样。怀疑引物有问题，换了新的引物，可还是一样。请高手们帮帮忙
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eric930[使用道具]
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发表于 2015-1-14 11:12 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

你这marker跑的也很烂啊！ 考虑是不是胶的问题或者是配胶用的缓冲液的问题？最近用的是新配的缓冲液还是？
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49888[使用道具]
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发表于 2015-1-14 11:23 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

没什么大问题，DNA量多时带型会有一点弥散
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ujne[使用道具]
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发表于 2015-1-14 11:24 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
你这marker跑的也很烂啊！ 考虑是不是胶的问题或者是配胶用的缓冲液的问题？最近用的是新配的缓冲液还是？

==========================================================

缓冲液是买的50* 然后最近稀释的，如果是胶的问题 另两个引物跑的还不错啊
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ujne[使用道具]
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发表于 2015-1-14 11:24 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大


QUOTE:
原帖由 49888 于 2015-1-14 11:23 发表 bbcodeurl('http://bbs.antpedia.com/images/common/back.gif', '%s')

没什么大问题，DNA量多时带型会有一点弥散

那通过什么方式可以改进呢？减少模板还是引物咧？主要是原来一直这样做 条带都不这么弥散 挺细的
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发表于 2015-1-14 11:25 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大


QUOTE:
原帖由 ujne 于 2015-1-14 11:24 发表 bbcodeurl('http://bbs.antpedia.com/images/common/back.gif', '%s')
你这marker跑的也很烂啊！ 考虑是不是胶的问题或者是配胶用的缓冲液的问题？最近用的是新配的缓冲液还是？

==========================================================

缓冲液是买的50* 然后最近稀释的，如果是胶的问题  ...

用浓度大一点的胶跑就可以了
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发表于 2015-1-14 11:25 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

怎么感觉不像一条带呢   你再跑时间长点看一下   maker也不好   也可能是胶的问题
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zzzz[使用道具]
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发表于 2015-1-14 11:25 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

基本是胶有问题，或者换新的电泳液
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发表于 2015-1-14 11:26 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

感觉胶的问题
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misswu61[使用道具]
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发表于 2015-1-14 11:26 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

好飘逸的maker
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