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标题:【求助】 PCR结果只有引物二聚体

cocacola[使用道具]
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发表于 2015-1-14 15:40 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
你看着加的挺多的，但是P完后没剩多少的。甘油，一般就10ul体系用的，20的话就不用的。PCR就是要细心，该加的东西不能少，该换枪头的要换，退火温度要摸索好的，东西都要在冰上完全融化。。。。。。实验么，慢慢来会比较快。
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toy[使用道具]
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发表于 2015-1-14 15:40 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
哦...唉....耐心不了...因为之前p出来的过的，现在突然又不行了...-0-
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shenkunjie[使用道具]
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发表于 2015-1-14 15:41 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

我这两天也是这个问题,同学说是引物的问题,我正在等新合成的引物到.
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toy[使用道具]
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发表于 2015-1-14 15:41 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
我明天也拿新的引物试试...-0-...唉...杯具...
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XYZQ[使用道具]
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发表于 2015-1-14 15:42 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
换dntp,换buffer，换酶，你全部都换掉，再做一遍，我觉得是某个出问题了，我原来跟你情况一摸一样
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baidukk[使用道具]
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发表于 2015-1-14 15:44 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
我25体系的都快p一个月了,还是没有理想条带,都快疯了,看来毕不了业啦
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lixi559[使用道具]
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发表于 2015-1-14 15:44 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
-0-...模板重新提取了，酶用了两种（酶是mix的），引物重新稀释过（引物二聚体那么亮，引物应该没问题吧），程序神马都试得很差不多了...
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lixi559[使用道具]
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发表于 2015-1-14 15:45 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
-0-..你是什么问题？一个月，你用了多少酶啊....我也是毕业论文...唉..-0-
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zbboom[使用道具]
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发表于 2015-1-14 15:45 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
我每次只p10个样品而已
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viviwang1987[使用道具]
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发表于 2015-1-14 15:45 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

你用的rTaq酶吧？那个酶我做PCR的时候也是有时候能P出来，有时候P不出来
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