PCR仪 » 讨论区 » 经验共享 » 【求助】测序中断的原因

采购询价

点击提交代表您同意 《用户服务协议》 《隐私政策》

 18  2/2 ‹‹12
 
需要登录并加入本群才可以回复和发新贴
打印 | 推荐 | 订阅 | 收藏

标题:【求助】测序中断的原因

yueban-1147[使用道具]
四级
Rank: 4


UID 75776
精华 0
积分 692
帖子 1064
信誉分 100
可用分 6113
专家分 0
阅读权限 255
注册 2011-10-27
状态 离线
11

发表于 2015-1-14 16:22 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
条件允许的话,建议可以换一个载体试试~
顶部
zhenxin[使用道具]
四级
Rank: 4


UID 76024
精华 0
积分 748
帖子 1216
信誉分 100
可用分 6848
专家分 0
阅读权限 255
注册 2011-10-31
状态 离线
12

发表于 2015-1-14 16:22 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
再送个样去测序试试，波峰很乱……
顶部
ladyhuahua[使用道具]
四级
Rank: 4


UID 76658
精华 0
积分 984
帖子 1667
信誉分 100
可用分 9116
专家分 0
阅读权限 255
注册 2011-11-8
状态 离线
13

发表于 2015-1-14 16:22 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
换一家测序价格在30元以上的公司测，应该就行了！
顶部
kuohao17[使用道具]
四级
Rank: 4


UID 77299
精华 0
积分 559
帖子 716
信誉分 101
可用分 4453
专家分 10
阅读权限 255
注册 2011-11-15
状态 离线
14

发表于 2015-1-14 16:23 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
可能PCR产物较杂，做克隆，多筛选几个，然后测序即可。
顶部
coolcool[使用道具]
三级
Rank: 3Rank: 3


UID 72942
精华 0
积分 264
帖子 227
信誉分 100
可用分 1941
专家分 0
阅读权限 255
注册 2011-9-16
状态 离线
15

发表于 2015-1-14 16:23 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
那就从中间设计引物， 向两边测，然后拼接！

=================================================================================================

感谢提供的意见，已经从中间设计了测序引物往两端测，获得中间片段较好，另一端还是测不过PolyT 结构，只能先用测出的部分。
顶部
coolcool[使用道具]
三级
Rank: 3Rank: 3


UID 72942
精华 0
积分 264
帖子 227
信誉分 100
可用分 1941
专家分 0
阅读权限 255
注册 2011-9-16
状态 离线
16

发表于 2015-1-14 16:24 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
换一家测序价格在30元以上的公司测，应该就行了！

=======================================================================

测序公司回复的结果是对于重复序列的结构也没有办法，只能重新设计测序引物，避开这段序列。
顶部
xuuuu[使用道具]
三级
Rank: 3Rank: 3


UID 118128
精华 1
积分 444
帖子 503
信誉分 102
可用分 3386
专家分 10
阅读权限 255
注册 2013-12-10
状态 离线
17

发表于 2015-1-14 16:24 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大


QUOTE:
原帖由 coolcool 于 2015-1-14 16:24 发表 bbcodeurl('http://bbs.antpedia.com/images/common/back.gif', '%s')
换一家测序价格在30元以上的公司测，应该就行了！

=======================================================================

测序公司回复的结果是对于重复序列的结构也没有办法，只能重新设计测序引物，避开这段序列。 ...

出结果就好！
顶部
glass[使用道具]
四级
Rank: 4


UID 76223
精华 0
积分 715
帖子 1109
信誉分 100
可用分 6373
专家分 0
阅读权限 255
注册 2011-11-2
状态 离线
18

发表于 2015-1-14 16:24 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

有二级结构，建议：
1，将反应试剂加倍量测
2，试一下测序测序反应时加入打破二级结构的试剂，如DMSO。
3，最直接的方法应该是建克隆测序，正反向测序然后拼接，当然时间会长一些。
顶部
 18  2/2 ‹‹12