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标题:【求助】PCR不稳定

feima+[使用道具]
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发表于 2015-1-14 16:35 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

【求助】PCR不稳定

我扩的pcr很不稳定，之前扩出来了~在做的时候有没有带了~这是为什么呢？
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zhenxin[使用道具]
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发表于 2015-1-14 16:35 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
这种问题是PCR中常见的问题     首先保证自己没加错东西  东西的量没加错   体系加好后混合均匀  做做阴阳性对照   在这基础上然后找找看什么试剂出了问题或者浓度不合适  不行的换掉
不要盲目的不停的做  停下来思考下   想想自己到底什么地方出了问题  这才是关键
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misswu61[使用道具]
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发表于 2015-1-14 16:35 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

模板可能浓度有降低。
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3N4G[使用道具]
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发表于 2015-1-14 16:36 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
模板浓度不能太高，我做了几个不同模板浓度对比试验，太高或者太低效果都不好或者没有目的条带。。。
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66+77[使用道具]
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发表于 2015-1-14 16:36 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

我跟楼主有一样的问题，PCR重复性低，按照一样的条件重新做了几次，它又跑出来了，但是条带亮度很浅，我也搞不明白是什么原因，现在也不知道下一步 要怎么搞了
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