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标题:【求助】帮忙分析下PCR结果吧！

qqq111[使用道具]
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发表于 2015-1-14 17:06 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

貌似全是引物二聚体呀
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glass[使用道具]
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发表于 2015-1-14 17:06 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
对照是什么意思，是不是不加模版的对照，还是阳性对照？请不吝指教！

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一般阴性对照是要有的，阳性对照主要在摸索体系与条件时要的，pcr做多了就懂了。
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glass[使用道具]
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发表于 2015-1-14 17:06 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
引物已经形成二聚体了，丢那星星

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您说的我不是太清楚，还请详细说下，谢谢
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jebel[使用道具]
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发表于 2015-1-14 17:07 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

尽信书则不如无书，你把退火的时间缩短些，我们做的时候没你的那么长的，我们一般是1min左右的。没有一成不变的实验方案，你自己调整一下，调整一下条件重新跑一下pcr。可能就出现了的，我昨天跑出的条带和你的相似，那些条带应该是二聚体的。
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loli[使用道具]
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发表于 2015-1-14 17:07 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

设计对照，检验引物质量
调整PCR条件（退火）
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xyw5[使用道具]
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发表于 2015-1-14 17:07 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

感觉你的条带 不是很明显 你可以继续优化条件 酶也可以用单个的 我以前也用预混的结果不是很好 还有设对照 祝你好运
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mamamiya[使用道具]
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发表于 2015-1-14 17:08 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
貌似有很模糊的母目的条带 酶切看看吧
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leifengta[使用道具]
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发表于 2015-1-14 17:08 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
不一定吧，如果我转化进感受态的话，假阳性是很多的~~那时郁闷死我，还好~~我只要一个阳性细菌就好了~

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我是说从楼主给的图片来看，虽然没有明显的条带，但在目的条带大小位置的，显然都是阳性。当然我不是说菌液鉴定都是阳性，呵呵不然何需鉴定。
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leifengta[使用道具]
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发表于 2015-1-14 17:08 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
您好，我可不可以直接用PCR产物做模版，在跑一次PCR，谢谢！

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之前我们实验室有人那样做过，但是我不确定你那个P出来会是怎样，呵呵因为那个产物看上去太弱了~~
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zwsyrt[使用道具]
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发表于 2015-1-14 17:09 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

在1000到2000之间好像是有条带的。只是很模糊。加个小提的质粒看看是不是那个位置，如果是的话那就优化一下条件吧。
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