【求助】帮忙分析下PCR结果吧！ - 经验共享

需要登录并加入本群才可以回复和发新贴

UID 75776
精华 0
积分 692
帖子 1064
信誉分 100
可用分 6113
专家分 0
阅读权限 255
注册 2011-10-27
状态离线

小中大

我就想问一下为什么，那个退火和延伸时间怎么那么长啊，菌耶做pcr是可以的，一般不会出什么问题，但是那要看你有没有转化进去。还有就是你的pcr体系的模版加的太多了，0.5-1ul就行，还有就是要做对照

PINK[使用道具]
三级
Rank: 3

UID 73133
精华 0
积分 418
帖子 536
信誉分 100
可用分 3488
专家分 0
阅读权限 255
注册 2011-9-19
状态离线

小中大

首先，PCR出不来结果原因很多，最常见的解决方法是首先，确定引物的正确性，第二，也是最重要的一点，退火温度进行梯度摸索，以确定最佳的退火温度，第三，还要在PCR的时候加一个阳性和阴性对照，来综合判断，这是我多年PCR的经验，希望可以给你一点启发！