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标题:[未解决]合成的抗菌材料的电镜实验求助

  [未解决]本主题悬赏 可用分 10  
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发表于 2015-1-16 20:28 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

合成的抗菌材料的电镜实验求助

我的材料是直接用粉末压成片，然后拿去养菌，现在要看菌在材料表面的形态，但由于材料在任何溶剂中都会崩解散开，因而想求助各位大神有木有一种固定方法是可以不用溶剂的？
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哈达[使用道具]
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发表于 2015-1-16 20:28 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
你的材料溶解于乙醇？不能逐步脱水？
但我猜想你的材料在水中是不溶解的吧
那你可以把你养菌后的材料用PBS 洗干净，然后再戊二醛里面固定细菌，晾干至完全没有水分，就可以做电镜了
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发表于 2015-1-16 20:32 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
呵呵，用粉末压片就是麻烦一些

你可以试试直接用多聚甲醛熏蒸的方法，印象中曾经看过类似的文章，好像就是中文的
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发表于 2015-1-16 20:35 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
固体培养基可以长细菌的吗？那你要怎么去除样品表面飞固定的细菌 在做电镜呢
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发表于 2015-1-16 20:38 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
1、先离心
2、用戊二醛2.5%的戊二醛在4度冰箱固定1.5个小时
3、用pH6.8的PBS冲洗三次，每次10分钟
4、用50%，70%，80%，90%乙醇梯度脱水，每次10-15分钟
5、用100%的乙醇脱水三次，每次10-15分钟
6、100%乙醇：乙酸异戊酯=1：1和纯乙酸异戊酯置换，每次15分钟
7、置换后的样品放入滤纸上，在干燥器中保持8小时以上
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发表于 2015-1-16 20:41 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
你可以尝试着 直接喷金做电镜，固定在台子上的时候 把你的样品切开来，切面与台面90度，这样就可以看细菌和界面了，
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mico_11[使用道具]
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发表于 2015-1-16 20:45 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
界面。。这显然需要扫描电镜啊，透射看界面太费劲了，不过如果不好脱水的话可能你需要环境扫描或者冷冻台
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