扫描电镜之家

实验需要进行对一组SMPU/PNIPAm半互穿材料进行TEM测试表征，我制备的样品为流延法制备的半互穿膜，超薄切片机一般TEM测试中心都应该有吧？？还有我这是关于形状记忆聚氨酯与水凝胶的互穿体系，是选择用染色法还是用切片法来进行试验比较好？制样怎么制，我小老板老让我制好样拿去测，可是用什么制样及染色？大约测5个样，一般需要多少钱？（老板比较抠）有可以做TEM样品的请联系405248994！
由于金币不多，希望还可以请教一个问题，我互穿的薄膜希望对其互穿程度进行表征，试验方案是蚀刻形状记忆聚氨酯，然后做SEM的扫描电镜图，想要了解的是什么溶剂可以蚀刻线性聚氨酯呢？DMF，NAOH除外，还有那些可以参考的溶剂呢，多多指点不胜感激！！！

如果你直接做成膜了的话，一般厚度都超过测试范围了，透射电镜探测的厚度一般在一百或者几百纳米范围内，根据加速电压不同而不同，因此样品厚度一般控制在100nm以内。你的样品如果已经流延成膜了，需要将这个膜先切成非常窄的小条，然后用包埋剂包埋固化后才能做超薄切片。

上海很多高校应该都能做这个的，不要光联系化学方面的，一些医学院或者生理实验的经常会切片和染色，具体询问他们，应该是能够解决问题的。如果需要超薄切片，除非人家跟你关系铁，否则不是两三百能解决一个样品的，当然不排除为了中饱私囊给你量大从优的，呵呵

在化学化工里，SEM是scanning electron microscope的缩写，指扫描电子显微镜是一种常用的材料分析手段。  
扫描电子显微镜于20世纪60年代问世，用来观察标本的表面结构。其工作原理是用一束极细的电子束扫描样品，在样品表面激发出次级电子，次级电子的多少与电子束入射角有关，也就是说与样品的表面结构有关，次级电子由探测体收集，并在那里被闪烁器转变为光信号，再经光电倍增管和放大器转变为电信号来控制荧光屏上电子束的强度，显示出与电子束同步的扫描图像。图像为立体形象，反映了标本的表面结构。为了使标本表面发射出次级电子，标本在固定、脱水后，要喷涂上一层重金属微粒，重金属在电子束的轰击下发出次级电子信号。 　　目前扫描电镜的分辨力为6~10nm，人眼能够区别荧光屏上两个相距0.2mm的光点，则扫描电镜的最大有效放大倍率为0.2mm/10nm=20000X。 　　它是依据电子与物质的相互作用。当一束高能的人射电子轰击物质表面时，被激发的区域将产生二次电子、俄歇电子、特征x射线和连续谱X射线、背散射电子、透射电子，以及在可见、紫外、红外光区域产生的电磁辐射。同时，也可产生电子-空穴对、晶格振动（声子）、电子振荡（等离子体）。原则上讲，利用电子和物质的相互作用，可以获取被测样品本身的各种物理、化学性质的信息，如形貌、组成、晶体结构、电子结构和内部电场或磁场等等。扫描电子显微镜正是根据上述不同信息产生的机理，采用不同的信息检测器，使选择检测得以实现。如对二次电子、背散射电子的采集，可得到有关物质微观形貌的信息；对x射线的采集，可得到物质化学成分的信息。
编辑本段特点
　　和光学显微镜及透射电镜相比，扫描电镜SEM（Scanning Electron Microscope）具有以下特点： 　　(一) 能够直接观察样品表面的结构，样品的尺寸可大至120mm×80mm×50mm。 　　(二) 样品制备过程简单，不用切成薄片。 　　(三) 样品可以在样品室中作三度空间的平移和旋转，因此，可以从各种角度对样品进行观察。 　　(四) 景深大，图象富有立体感。扫描电镜的景深较光学显微镜大几百倍，比透射电镜大几十倍。 　　(五) 图象的放大范围广，分辨率也比较高。可放大十几倍到几十万倍，它基本上包括了从放大镜、光学显微镜直到透射电镜的放大范围。分辨率介于光学显微镜与透射电镜之间，可达3nm。 　　(六) 电子束对样品的损伤与污染程度较小。 　　(七) 在观察形貌的同时，还可利用从样品发出的其他信号作微区成分分析。
编辑本段1．镜筒
　　镜筒包括电子枪、聚光镜、物镜及扫描系统。其作用是产生很细的电子束(直径约几个nm)，并且使该电子束在样品表面扫描，同时激发出各种信号。
编辑本段2．电子信号的收集与处理系统
　　在样品室中，扫描电子束与样品发生相互作用后产生多种信号，其中包括二次电子、背散射电子、X射线、吸收电子、俄歇(Auger)电子等。在上述信号中，最主要的是二次电子，它是被入射电子所激发出来的样品原子中的外层电子，产生于样品表面以下几nm至 　　几十nm的区域，其产生率主要取决于样品的形貌和成分。通常所说的扫描电镜像指的就是二次电子像，它是研究样品表面形貌的最有用的电子信号。检测二次电子的检测器(图15(2)的探头是一个闪烁体，当电子打到闪烁体上时，1就在其中产生光，这种光被光导管传送到光电倍增管，光信号即被转变成电流信号，再经前置放大及视频放大，电流信号转变成电压信号，最后被送到显像管的栅极。
编辑本段3．电子信号的显示与记录系统
　　扫描电镜的图象显示在阴极射线管(显像管)上，并由照相机拍照记录。显像管有两个，一个用来观察，分辨率较低，是长余辉的管子；另一个用来照相记录，分辨率较高，是短余辉的管子。
编辑本段4．真空系统及电源系统
　　扫描电镜的真空系统由机械泵与油扩散泵组成，其作用是使镜筒内达到 10(4～10(5托的真空度。电源系统供给各部件所需的特定的电源。
编辑本段工作原理
　　从电子枪阴极发出的直径20(m～30(m的电子束，受到阴阳极之间加速电压的作用，射向镜筒，经过聚光镜及物镜的会聚作用，缩小成直径约几毫微米的电子探针。在物镜上部的扫描线圈的作用下，电子探针在样品表面作光栅状扫描并且激发出多种电子信号。这些电子信号被相应的检测器检测，经过放大、转换，变成电压信号，最后被送到显像管的栅极上并且调制显像管的亮度。显像管中的电子束在荧光屏上也作光栅状扫描，并且这种扫描运动与样品表面的电子束的扫描运动严格同步，这样即获得衬度与所接收信号强度相对应的扫描电子像，这种图象反映了样品表面的形貌特征。 　　扫描电镜样品制备的主要要求是：尽可能使样品的表面结构保存好，没有变形和污染，样品干燥并且有良好导电性能。 　　另外，扫描电镜生物样品制备技术大多数生物样品都含有水分，而且比较柔软，因此，在进行扫描电镜观察前，要对样品作相应的处理。

透射电子显微镜的成像原理可分为三种情况： 　　吸收像：当电子射到质量、密度大的样品时，主要的成相作用是散射作用。样品上质量厚度大的地方对电子的散射角大，通过的电子较少，像的亮度较暗。早期的透射电子显微镜都是基于这种原理  TEM透射电镜
。 衍射像：电子束被样品衍射后，样品不同位置的衍射波振幅分布对应于样品中晶体各部分不同的衍射能力，当出现晶体缺陷时，缺陷部分的衍射能力与完整区域不同，从而使衍射钵的振幅分布不均匀，反映出晶体缺陷的分布。 相位像：当样品薄至100Å以下时，电子可以传过样品，波的振幅变化可以忽略，成像来自于相位的变化。
编辑本段组件
　　电子枪：发射电子，由阴极、栅极、阳极组成。阴极管发射的电子通过栅极上的小孔形成射线束，经阳极电压加速后射向聚光镜，起到对电子束加速、加压的作用。 聚光镜：将电子束聚集，可用于控制照明强度和孔径角。 样品室：放置待观察的样品，并装有倾转台，用以改变试样的角度，还有装配加热  
、冷却等设备。 物镜：为放大率很高的短距透镜，作用是放大电子像。物镜是决定透射电子显微镜分辨能力和成像质量的关键。 中间镜：为可变倍的弱透镜，作用是对电子像进行二次放大。通过调节中间镜的电流，可选择物体的像或电子衍射图来进行放大。 透射镜：为高倍的强透镜，用来放大中间像后在荧光屏上成像。 此外还有二级真空泵来对样品室抽真空、照相装置用以记录影像。

　　透射电子显微镜在材料科学、生物学上应用较多。由于电子易散射或被物体吸收，故穿透力低，样品的密度、厚度等都会影响到最后的成像质量，必须制备更薄的超薄切片，通常为50～100nm。所以用透射电子显微镜观察时的样品需要处理得很薄。常用的方法有：超薄切片法、冷冻超薄切片法、冷冻蚀刻法、冷冻断裂法等。对于液体样品，通常是挂预处理过的铜网上进行观察。
　　TEM常用于研究纳米材料的结晶情况，观察纳米粒子的形貌、分散情况及测量和评估纳米粒子的粒径。是常用的纳米复合材料微观结构的表征技术之一。 　　以电子束作光源，电磁场作透镜。电子束波长与加速电压(通常50~120KV)的平方根成反比。 　　由电子照明系统、电磁透镜成像系统、真空系统、记录系统、电源系统等5部分构成。 　　分辨力0.2nm，放大倍数可达百万倍。 　　TEM分析技术是以波长极短的电子束作照明源，用电磁透镜聚焦成像的一种高分辨率（1nm）、高放大倍数的电子光学分析技术； 　　用电镜（包括TEM）进行样品分析时，通常有两个目的：一个是获得高倍放大倍数的电子图像，另一个是得到电子衍射花样； 　　TEM常用于研究纳米材料的结晶情况，观察纳米粒子的形貌、分散情况及测量和评估纳米粒子的粒径。是常用的纳米复合材料微观结构的表征技术之一。

tem是哥永远的痛！！！
破老板就是不让做，因为很贵，300+一个样吧
反正不让做。
互传网络还是用染色的方法吧

具体你去问问吧
通常正规一点的学校都有TEM
不过染色的装置不一定有
像我们这边偏无机的就没有染色装置

我制作的是膜，厚度有薄有厚，如果用超薄切片法的话，特点是什么，粉末还有一些比较脆的样品能测否？假如不能用超薄切片法，那用染色法是不是没有膜厚度所带来的制样问题，以及染色的缺点是什么啊？

膜的话好像有专门的镀膜机
切片都由超薄切片机或者金刚石刀制样
至于染色，好像既可以自己处理（四氧化二俄等），也有专门的染色装置
具体哥没做过。。。
不好意思了

TEM还算常规吧

视两相的电子散射能力差异，若差异小，应该用染色的方法来增大反差，选择性的提高一相的衬度。一般用重金属氧化物来当做染色剂。

互穿的结构可以试试用TEM三维重构的方法，构建三维的图像，将非常漂亮。

你好，我想做微生物SEM，文献中用到了乙醇-丙酮脱水，临界点干燥，但是没有具体操作方法，能给些建议么。