生物制药 » 讨论区 » 经验共享 » 【求助】HPLC测试结果不一致，求解决方法

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标题:【求助】HPLC测试结果不一致，求解决方法

eric930[使用道具]
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发表于 2015-1-21 16:47 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
使用流动相溶解样品，或者高水相溶剂溶解样品
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rxcc33[使用道具]
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发表于 2015-1-21 16:47 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
使用流动相溶解样品，加上保护柱。进样阀注意要时常清洗。
重复进样看看。
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dragonkilly[使用道具]
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发表于 2015-1-21 16:48 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
哈哈 这个问题我遇到过 说说我的经验吧 有好几个办法：调节进样量，换流动相（估计你用的是国产的） 调节流动相比例 必要时重新做标准溶液 ，还有一个是 你的标准曲线用流动相稀释看看效果等等很多办法吧 流动相的ph 流动相的分离能力等等都需要考虑在内！
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yhz1973[使用道具]
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发表于 2015-1-21 16:48 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
首先要用流动相配药，
还有你的药物浓度是不是有点高了啊
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milkdog[使用道具]
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发表于 2015-1-21 16:48 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

楼主你走BLANK没有出现怪峰，说明仪器系统没有问题。
从楼主的描述来看，最大的变量是时间。不知楼主你的样品稳定性如何，在试验过程中是否要求控温。
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baidukk[使用道具]
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发表于 2015-1-21 16:49 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
第一针是否充分平衡？梯度还是等度？

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平衡好了，因为是新柱子，我是过夜平衡的。是等度洗脱的
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baidukk[使用道具]
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发表于 2015-1-21 16:49 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
样品降解了，所以前面出现其他杂质峰

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新配制的样品，不经过复杂的处理过程，直接加buffer稀释就可以了，应该不会是样品降解的，这个是标准液
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baidukk[使用道具]
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发表于 2015-1-21 16:50 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
是不是样品溶液不稳定啊

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稳定的，是基本的buffer，样品平常都是保存常温的，只有配制好了之后才保存-20℃，我每次取一支，用完就丢掉了，不重复使用的
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baidukk[使用道具]
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发表于 2015-1-21 17:11 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
要么你跑到后面柱子比较脏了，这种问题我也遇到过，尤其如果是中药。也可能是你样品本身就不稳定。建议把柱子冲洗干净后再做一次，样品的测定不要间隔时间太远

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这个是新柱子，而且后面出现的峰型才是我想要的，和我拿到的文献上的峰型一致，我想的是拿后面的结果
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baidukk[使用道具]
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发表于 2015-1-21 17:12 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
使用流动相溶解样品，或者高水相溶剂溶解样品

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用流动相吗？我这个有个protocol的，是用的酶解样品的酶的buffer，这个buffer我单独跑过几次，没有影响的，而且我的流动相就是高水相的，就是水
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