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标题:[已解决]请教大家一般在做完样品以后是怎么冲洗色谱柱的？

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分析工[使用道具]
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发表于 2010-12-23 15:09 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

请教大家一般在做完样品以后是怎么冲洗色谱柱的？

请教大家一般在做完样品以后是怎么冲洗色谱柱的？谈谈大家的经验之谈。我们分析室每次做完样品，由于样品比较多，流动相里含有弱酸弱碱的缓冲液都是使用乙腈+水=50+50洗柱液大流速（1.0mol/l）冲洗到下班然后改小流速（0.5mol/l）冲洗过夜，第二天接着做样。好像仪器很少休息，色谱柱（安捷伦C18柱）坏的也比较快，新柱子没用几天，峰就拖尾。实在无药可救的时候，就反着用，好像也用不了几天。最多一根柱子用两三个月就算到顶了。怎样才能延长柱子的使用寿命呢？
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358uwcj[使用道具]
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 小中大
即使是不含盐，用单一比例的溶液冲洗，也会洗不干净的

先用高比例的水洗，再用高比例的有机溶剂洗

把不同极性的杂质都洗掉
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jeirf3uwd[使用道具]
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发表于 2010-12-23 15:53 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
我们一般先大比例的水（乙腈：水=10：90）冲，再换50：50冲。
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qiuyf-2007[使用道具]
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发表于 2010-12-23 17:09 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
估计是因为杂质太多了，清洗含盐流动相一般用同比例不含盐的流动相冲洗然后逐步换成有机相，以清洗吸附性较强的物质，这要根据你检测物质的性质来决定

根据你的情况，建议设定梯度洗脱
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xiongwei397[使用道具]
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发表于 2010-12-23 17:09 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
如果天天用，个人认为，没有必要晚上清洗系统。

只用小流速就可以了。
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ttkl533[使用道具]
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发表于 2010-12-23 17:10 资料 个人空间 短消息  加为好友 QQ

 小中大


QUOTE:
原帖由 分析工 于 2010-12-23 15:09 发表 bbcodeurl('http://bbs.antpedia.com/images/common/back.gif', '%s')
请教大家一般在做完样品以后是怎么冲洗色谱柱的？谈谈大家的经验之谈。我们分析室每次做完样品，由于样品比较多，流动相里含有弱酸弱碱的缓冲液都是使用乙腈+水=50+50洗柱液大流速（1.0mol/l）冲洗到下班然后改小流速（0.5mol/l） ...

对于含酸碱的样品我们一般是先用低浓度的甲醇（乙腈更好，浓度在10%左右就可以了）进行冲洗，流速设定1、时间1h，然后再用纯甲醇进行冲洗，不要用含水的甲醇或乙腈保存柱子。再有就是防止柱压的骤然变化，调流速的时候要梯度升降。
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sseia42[使用道具]
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发表于 2010-12-23 17:10 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
既然冲洗过夜，就不要大流速冲了
做样多，样品杂，柱子寿命肯定短
不过三个月一根柱是够快的了
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hplcangel[使用道具]
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发表于 2010-12-23 17:10 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

回复 #1 分析工 的帖

如果使用缓冲溶液的话开始最好先用大比例的水（90%）充洗，然后拉梯度慢慢过渡到90%的有机溶剂冲洗一段时间。
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fence-straddler[使用道具]
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发表于 2010-12-23 17:53 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

回复 #1 分析工 的帖子

延长柱子的使用寿命，主要是流动相尤其是有缓冲盐的至少两天过滤一下，进的样品液也一定要过滤，缓冲盐的浓度尽量低，天天做样没必要老冲柱子，更没必要冲过夜，冲柱子应该有针对性。
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发表于 2010-12-24 09:38 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
乙腈+水=50+50有很多杂质洗脱不出来的，先用10%有机相清洗，再用90%以上有机相清洗。
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