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标题:【求助】感受态与质粒转化

bluelake[使用道具]
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发表于 2015-1-29 11:06 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
那就是感受态有问题，感受态为什么要放4°冰箱，不放-80°呢？

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那是因为做好了感受态接着就做质粒转化啊，放-80℃那不是又要活化吗？
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bluelake[使用道具]
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发表于 2015-1-29 11:07 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
检查一下氨苄的浓度，是不是太高，我的是50-100微克每毫升LB。

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我用的也是50微克每毫升LB
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hustwb[使用道具]
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发表于 2015-1-29 11:07 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
板没问题吧？？
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tieshazhang[使用道具]
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发表于 2015-1-29 11:08 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
估计是感受态问题，我们都是做完感受态液氮速冻后放在-80，全程在4度或者冰上无菌操作。再说里面加甘油了，不到5分钟就化了，楼主为啥要放在4度？
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小鱼鱼[使用道具]
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发表于 2015-1-29 11:08 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
做感受态细胞的时候细菌活力很重要啊，一定要在对数期。
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shanzhapia696[使用道具]
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发表于 2015-1-29 11:08 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

制备完感受态要放入-80℃保存啊，转化时取出来置于冰上自己融，然后就加质粒开始转化了啊，怎么还要活化？
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rxcc33[使用道具]
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发表于 2015-1-29 11:10 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
不然去公司订几只感受态做一下，有保证，我们原来自己做，现在都是从公司订。正好也鉴别下是不是你的感受态的问题。
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gogo[使用道具]
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发表于 2015-1-29 11:12 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

感受态现做现用吧
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bluelake[使用道具]
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发表于 2015-1-29 11:12 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
估计是感受态问题，我们都是做完感受态液氮速冻后放在-80，全程在4度或者冰上无菌操作。再说里面加甘油了， ...

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我是做了感受态以后，接着就要做质粒转化，所以就没有放到-80℃保存，因为不是批量做感受态，而是放在4℃条件下12h，第二天做质粒转化，这样不行吗?一定要放-80℃吗？
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bluelake[使用道具]
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发表于 2015-1-29 11:13 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
做感受态细胞的时候细菌活力很重要啊，一定要在对数期。

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摇菌一般也是过夜12h，应该菌的活力是可以保证吧？
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