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标题:【求助】感受态与质粒转化

nn255[使用道具]
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发表于 2015-1-29 11:20 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

把各个条件在检查一遍！
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hyuu[使用道具]
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发表于 2015-1-29 11:20 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

菌都不长   这不是转化的问题
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xueyouzhang[使用道具]
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发表于 2015-1-29 11:21 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
你的板确定好吗
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lixi559[使用道具]
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发表于 2015-1-29 11:21 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
楼主放四度真是难以想象，感受态制备时要一直保持低温，冰上进行。感受态做好后最好液氮速冻，然后放负八十。转化的时候从负八十拿出来冰上融化。一直放四度的话还有效率吗？
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ztonyc[使用道具]
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发表于 2015-1-29 11:22 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

应该是-80度吧！
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发表于 2015-1-29 11:22 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
转化后，记得要在无抗的LB中摇1h左右，让质粒抗性基因表达。
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发表于 2015-1-29 11:22 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

很难说，重新做一次吧
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changlhsyo[使用道具]
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发表于 2015-1-29 11:23 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

应该是一楼所说，制备的感受态细胞出现问题……加入甘油后，短期可保存在-20℃冰箱中……
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zhenxin[使用道具]
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发表于 2015-1-29 11:24 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
感受态要-80度保存，用时取出后立即冰浴，不能放在4度
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rxcc33[使用道具]
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发表于 2015-1-29 11:25 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

感受态出问题了。
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