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标题:【求助】请高手指点为何会频繁出现此种污染?

00无名指00[使用道具]
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QUOTE:
原帖由 考拉乌拉拉 于 2015-1-29 15:54 发表 bbcodeurl('http://bbs.antpedia.com/images/common/back.gif', '%s')

嗯,那真的是环境脏了么?建议趁过年有时间,把细胞间彻底用甲醛熏蒸一下,所有的枪,用的瓶子什么都换了吧,其他也没有什么办法了。。。
ps:黑胶虫污染?只有国内才有人说这个东东。国外的文献有提到过这种东西么? ...

请问如果怀疑培养基和血清什么的污染,要做培养检测有没有污染的话,怎么做?
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考拉乌拉拉[使用道具]
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回复 #11 00无名指00 的帖子

请问如果怀疑培养基和血清什么的污染,要做培养检测有没有污染的话,怎么做?
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PINK[使用道具]
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培养基血清出问题了那是没办法的是,只能全换新的。血清最好用进口的。培养皿用一次性的吧。。。
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一种 可能是细胞冻存时就污染了,只能放弃,或者培养时加抗生素,等一段时间细胞经过传代彻底清除了细菌后,再用无抗生素的培养基,一种可能是细胞间,或者超净台,培养箱里的某个角落就有菌群污染源一直没有清除,建议细胞间至少一个月熏一次乳酸灭菌,因为气体可以无孔不入灭菌起来比紫外线有优势。
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黑焦虫污染,比较难解决,除非你的细胞活性很好,否则就选择在重新培养。
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细胞培养用的瓶子和吸管都换一次性的试试,把所有可以更换的条件都换一遍,应该可以找到原因的,细胞房的清洁是必须的,一定要好好除菌。
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@花开花落@[使用道具]
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你们培养基买的还是配的?有条件就什么都换,没条件就什么都滤,1=3最多15min吧,如果一个小时,那叫我穿56皿的情何以堪呀!
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mamamiya[使用道具]
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把你的培养基和血清过滤一下,留个样检一下无菌,把操作台好好清理一下,用前紫外灭菌40分钟,一直开着风
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考拉乌拉拉[使用道具]
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QUOTE:
原帖由 天下虫子 于 2015-1-29 15:57 发表 bbcodeurl('http://bbs.antpedia.com/images/common/back.gif', '%s')
一种 可能是细胞冻存时就污染了,只能放弃,或者培养时加抗生素,等一段时间细胞经过传代彻底清除了细菌后,再用无抗生素的培养基,一种可能是细胞间,或者超净台,培养箱里的某个角落就有菌群污染源一直没有清除,建议细胞间至少一 ...

同学你好,我现在是这样子做的,我请一名操作有把握的同学用我的培养基。血清、胰酶等进行操作,除此之外所有其他的瓶子、试管等都用他自己的,这样子排除其他任何可能造成污染的因素,结果这两天下来,没有发现污染,这样子,似乎可以排除我的培养试剂的问题了,我准备再接着用人家的东西进行一次培养,所有这些培养基,血清之类的都用别人的,这样子如果出现污染,那就可以确定是出在自己操作方面的问题,你看这样子可行么?
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考拉乌拉拉[使用道具]
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原帖由 @花开花落@ 于 2015-1-29 15:58 发表 bbcodeurl('http://bbs.antpedia.com/images/common/back.gif', '%s')

你们培养基买的还是配的?有条件就什么都换,没条件就什么都滤,1=3最多15min吧,如果一个小时,那叫我穿56皿的情何以堪呀!

同学你好,我现在是这样子做的,我请一名操作有把握的同学用我的培养基。血清、胰酶等进行操作,除此之外所有其他的瓶子、试管等都用他自己的,这样子排除其他任何可能造成污染的因素,结果这两天下来,没有发现污染,这样子,似乎可以排除我的培养试剂的问题了,我准备再接着用人家的东西进行一次培养,所有这些培养基,血清之类的都用别人的,这样子如果出现污染,那就可以确定是出在自己操作方面的问题,你看这样子可行么?
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