药物分析

我们现在仿制一复方制剂，成分之一为尿囊素，原标准为液相方法测定含量，C18柱，流动相为甲醇-0.03mol/l磷酸二氢钠溶液（10:90），结果我换了不同品牌的C18柱，尿囊素均出峰时间很短，3min以内，无法和溶解峰分开。后更换流动相庚烷磺酸钠溶液-乙腈（85:15）流动相，试过C18、C8、氨基柱，均是3min以内，无法和溶解峰分开。查阅文献流动相乙腈-水（90:10）使用氨基柱，但是依法操作，测定含量的仍然是3min以内，无法和溶解峰分开。
请各位战友，帮我分析一下，我现在应选何种色谱条件，能很好测定尿囊素含量？
多谢指教！！

用C18柱，流动相为甲醇-0.03mol/l磷酸二氢钠溶液（10:90），这个方法流动相pH多少？

刚查了尿囊素结构，该物质有多个碱性基团，流动相应偏碱有助于保留。色谱方法的操作条件只能作为参考，实际仍需细调，就拿“甲醇-0.03mol/l磷酸二氢钠溶液（10:90）”这个条件说吧，没保留，可以将水溶液的比例加大试试（如甲醇：0.03mol/l磷酸二氢钠溶液=5:95），如果还不行，可试着将pH调得再大一些（当然得在柱的耐受范围内）。最终的操作条件需要试验者本人来确定，已有的只是参考。