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标题:【求助】基因的相对表达量

jude[使用道具]
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发表于 2015-2-13 09:37 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

【求助】基因的相对表达量

我这有一个问题我一直没有想清楚： 大家看图， 标数字的都是内参基因，标字母的是目的基因。把目的基因条带的亮度和内参基因条带的亮度比较一下，就是目的基因的相对表达量么？ 为什么可以这么说？

我的实验是分正常组和模型组，我怎么觉得应该是将模型组的目的基因条带亮度和正常组目的基因条带亮度做比较才对呢？ 内参基因起什么作用呢？


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发表于 2015-2-13 09:39 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

目的基因的模型组和wt比只是看出表达有没有上调或下调，而内参基因的表达量是已知的，不论是控制组还是模型组，只有和已知量比才能看出目的基因的表达量吧。个人看法，仅供参考······
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yonger[使用道具]
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发表于 2015-2-13 09:39 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
用RT-PCR来比较基因的表达情况吧 先把RNA的量调到一样，多做几次平行实验。
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yonger[使用道具]
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发表于 2015-2-13 09:40 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

用rt-pcr来比较基因的相对表达情况比较方便吧  做一两次平行实验，简单明了
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douding66[使用道具]
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发表于 2015-2-13 09:40 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

同学，你说“标数字的都是内参基因，标字母的是目的基因”，我怎么看着你这每个标注都是数字与字母的混合体呢？？？你说了等于没说。汗！
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发表于 2015-2-13 09:41 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

因为你目的条带的多少可能不是基因本身的表达量的问题，而是模版DNA的量的多少造成的，所以为了排除这个可能性以及误差，就要用到内参基因来表示全部DNA的量。因此，在计算时，目的基因除以内参基因就能得到目的基因的相对表达量了。
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发表于 2015-2-13 09:43 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
你这个是半定量，最好用实时荧光定量PCR
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