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标题:【求助】转化涂板

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发表于 2015-2-13 16:32 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
是不是菌落为棉絮状？是不是根本没法挑？是不是还没过夜就长出来了？PS：要等培养基凉好了再加氨苄，混匀

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是啊 不太好挑  ，但是一般长了16个小时呢   培养基都是先涂IPTG和X-gal  完了37°放半个小时 再涂  

每次加氨苄是先把固体培养基化了，然后等不是很烫时加氨苄    然后倒板。
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zzzz[使用道具]
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发表于 2015-2-13 16:32 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
这个梯度做的太小了，应该是1微升+100微升，为好。或者采取划线的方式。
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发表于 2015-2-13 16:32 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

可能板子放的时间长了，重新倒一批板子试试。。。
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yes4[使用道具]
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发表于 2015-2-13 16:33 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

划线 做个梯度
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发表于 2015-2-13 16:38 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
是不是倒板子的时候温度太高了，抗生素都失活了
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S6044[使用道具]
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发表于 2015-2-13 16:39 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
我是0.7ul的载体  4.3ul的目的片段

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要测一下目的片段的浓度，大概算一下比例，载体试剂盒里有计算方法的。浓度最好按要求来做，否则会影响连接
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greenbee[使用道具]
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发表于 2015-2-13 16:39 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

感受态活力太好了吧，可以把一管感受态分两管用！
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发表于 2015-2-13 16:40 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

用新鲜的平板，抗性涂30uL （100mg/mL），感受态细胞别太多（100ug足够）
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