【求助】PCR胶回收

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标题:【求助】PCR胶回收

dior[使用道具]
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发表于 2015-2-13 16:42 资料个人空间短消息加为好友

小中大

各位高手，新手想问pcr产物量达到什么程度才能回收，并进行TA克隆、连接转化、质粒提取、测序等后续工作啊。请求帮助阿。帮我看看我设计的简并引物PCR后的胶图，是否可以进行胶回收以及后续工作啊。

purrr[使用道具]
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发表于 2015-2-13 16:43 资料个人空间短消息加为好友

小中大

和markerb比较一下就行

wiwi[使用道具]
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发表于 2015-2-13 16:43 资料个人空间短消息加为好友

小中大

你的目的条带是最下边的么胶回收这个没什么硬性的要求只要你觉得可以就行能看清楚没有其他杂带即可

chengjie79[使用道具]
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发表于 2015-2-13 16:44 资料个人空间短消息加为好友

小中大

跑的好虚，回收只要和Marker比较就行

宁小胡[使用道具]
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发表于 2015-2-13 16:44 资料个人空间短消息加为好友

小中大

你上多少样啊?

mercedes[使用道具]
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发表于 2015-2-13 16:45 资料个人空间短消息加为好友

小中大

片段多了后面的连接，酶切才好做，尽量提高片段的量，EB染色至少能够看到明显的条带，胶回收也不是100%回收的，效率取决于片段的大小，量，用的回收柱子

boom[使用道具]
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发表于 2015-2-13 16:45 资料个人空间短消息加为好友

小中大

条带有些浅吧看着marker也不亮即使有非特异自己切胶一下就行了

jujuba[使用道具]
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发表于 2015-2-13 16:46 资料个人空间短消息加为好友

小中大

这样回收的话可能效果不是很好，建议你上样量再增大一些重新跑电泳，然后再回收。

tewank[使用道具]
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发表于 2015-2-13 16:46 资料个人空间短消息加为好友

小中大

跟Marker对比一下，看看亮度是它的几倍，可以根据Marker浓度估算产物浓度，适当调低曝光率有助于对比。不过如楼上所说，这个亮度实在是太低了，可以适当增加几次循环，或者略微提高点引物量，效果应该会好一些。

bangqi_k[使用道具]
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发表于 2015-2-13 16:46 资料个人空间短消息加为好友

小中大

把体系扩大点吧

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