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标题:【求助】pcr-DGGE

iii_ii[使用道具]
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发表于 2015-2-13 16:54 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

【求助】pcr-DGGE

细菌 引物338F 518R
pcr之后DGGE 银染 砌胶 回收 再pcr
这是DGGE之后pcr的结果 我做了很长时间
都是这样的结果 什么原因呀 怎么改进呀
请各位大侠帮一下


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2015-2-13 16:54
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remenb[使用道具]
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发表于 2015-2-13 16:54 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

有可能是引物的问题或者退火温度不适合
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49888[使用道具]
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发表于 2015-2-13 16:54 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

我也遇到过这样的问题，可以尝试稀释一下模板，或者用带GC夹的引物扩比较好一点，我觉得后者出来的可能性较大。
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发表于 2015-2-13 16:55 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

我也遇到过这样的问题，可以尝试稀释一下模板，或者用带GC夹的引物扩比较好一点，我觉得后者出来的可能性较大。
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shkudo[使用道具]
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发表于 2015-2-13 16:55 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
不知道是不是我视力不好，我怎么没看见条带呢
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shkudo[使用道具]
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发表于 2015-2-13 16:56 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
你如果一次PCR跑的很亮的条带的话，可能是你胶回收步骤没做好，或者割条带没割好，有些条带很模糊但不是真正的条带
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sistis[使用道具]
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发表于 2015-2-13 16:58 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
PCR条件有待优化
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发表于 2015-2-13 16:58 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
你如果一次PCR跑的很亮的条带的话，可能是你胶回收步骤没做好，或者割条带没割好，有些条带很模糊但不是真正 ...

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你好，后续做DGGE的话，需要胶回收吗
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youreyes[使用道具]
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发表于 2015-2-13 17:00 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
你好，后续做DGGE的话，需要胶回收吗

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我做过一次胶回收再跑DGGE，就是泳道没那么黑，感觉条带没那么亮了
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remonte[使用道具]
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发表于 2015-2-13 17:01 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

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