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标题:【求助】请各位同仁看看我的PCR效果能不能用

vivian4123[使用道具]
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发表于 2015-2-14 22:57 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

【求助】请各位同仁看看我的PCR效果能不能用

各位高手帮忙看看我的pcr电泳效果怎么样？可以用吗？请各位指教。


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2015-2-14 22:57
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seagate[使用道具]
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发表于 2015-2-14 22:58 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

割胶回收后用，，最好再摸下条件吧！
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vivian4123[使用道具]
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发表于 2015-2-14 22:59 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大


QUOTE:
原帖由 seagate 于 2015-2-14 22:58 发表 bbcodeurl('http://bbs.antpedia.com/images/common/back.gif', '%s')

割胶回收后用，，最好再摸下条件吧！

我就是割胶回收用的，条件问题的话，会是什么原因？
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vivian4123[使用道具]
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发表于 2015-2-14 23:02 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
条带之间的弥散状有影响吗？怎么能去掉？
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standbyme[使用道具]
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发表于 2015-2-14 23:02 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

建议不要吧~~换一下跑胶的缓冲液吧~~
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prettygirl@[使用道具]
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发表于 2015-2-14 23:02 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

跑个梯度PCR看，摸索适合的退火温度，再者，要是还有拖带，就进行胶回收，然后以胶回收产物做模板再跑一次PCR.哥哥我做SOE PCR就是这么干滴，希望对你有所启示
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发表于 2015-2-14 23:03 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大


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原帖由 standbyme 于 2015-2-14 23:02 发表 bbcodeurl('http://bbs.antpedia.com/images/common/back.gif', '%s')

建议不要吧~~换一下跑胶的缓冲液吧~~

我做PCR时候加了石蜡油，会不会有影响？
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vivian4123[使用道具]
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发表于 2015-2-14 23:04 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大


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原帖由 prettygirl@ 于 2015-2-14 23:02 发表 bbcodeurl('http://bbs.antpedia.com/images/common/back.gif', '%s')

跑个梯度PCR看，摸索适合的退火温度，再者，要是还有拖带，就进行胶回收，然后以胶回收产物做模板再跑一次PCR.哥哥我做SOE PCR就是这么干滴，希望对你有所启示 ...

可能是退火温度有问题啊？我都用一个温度跑的
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bangqi_k[使用道具]
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发表于 2015-2-14 23:05 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大


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原帖由 vivian4123 于 2015-2-14 23:03 发表 bbcodeurl('http://bbs.antpedia.com/images/common/back.gif', '%s')

我做PCR时候加了石蜡油，会不会有影响？

加石蜡油的意思是为了防止体系中的水蒸发掉~~估计影响的概率低于1%，基本不用考虑
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flower@@[使用道具]
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发表于 2015-2-14 23:05 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大


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原帖由 vivian4123 于 2015-2-14 23:02 发表 bbcodeurl('http://bbs.antpedia.com/images/common/back.gif', '%s')
条带之间的弥散状有影响吗？怎么能去掉？

有没有影响要看，你后续是做什么实验的，调整pcr体系和程序是有一定可能减少非特异性条带的，至于弥散有些是因为电泳缓冲液需要换了，或者电压电流没有调好，还有跑胶时的环境温度都有可能会影响的
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