【求助】 PCR产物回收

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标题:【求助】 PCR产物回收

天蝎座[使用道具]
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发表于 2015-2-15 17:01 资料个人空间短消息加为好友

小中大

目的条带是2K左右，pcr产物电泳显示大小1700左右，但是PCR产物回收后拿去测序总是测不出来，说是浓度太低，是为什么呀？O(∩_∩)O谢谢~

nut6694[使用道具]
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发表于 2015-2-15 17:02 资料个人空间短消息加为好友

小中大

产品回收之后要DNA沉淀浓缩一下哦

ALALA[使用道具]
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发表于 2015-2-15 17:02 资料个人空间短消息加为好友

小中大

送测序要达到一定的浓度，每个测序公司都会有说明的，PCR产物浓度是多少，或者是菌液的话浓度要达到多少，还有，PCR产物送测序的话最好还要纯化一下。

avi317[使用道具]
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发表于 2015-2-15 17:02 资料个人空间短消息加为好友

小中大

产物回收后直接测序吗应该再以回收纯化后的DNA为模板做二次PCR

天蝎座[使用道具]
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发表于 2015-2-15 17:03 资料个人空间短消息加为好友

小中大

QUOTE:

原帖由 nut6694 于 2015-2-15 17:02 发表 bbcodeurl('http://bbs.antpedia.com/images/common/back.gif', '%s')

产品回收之后要DNA沉淀浓缩一下哦

DNA沉淀浓缩？是什么呀。。。

天蝎座[使用道具]
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发表于 2015-2-15 17:04 资料个人空间短消息加为好友

小中大

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原帖由 ALALA 于 2015-2-15 17:02 发表 bbcodeurl('http://bbs.antpedia.com/images/common/back.gif', '%s')
送测序要达到一定的浓度，每个测序公司都会有说明的，PCR产物浓度是多少，或者是菌液的话浓度要达到多少，还有，PCR产物送测序的话最好还要纯化一下。 ...

嗯，谢谢~纯化了来着，但是可能浓度不太够，所以后来就加大了反应体系，浓缩了一下子就可以了，谢谢啦~

天蝎座[使用道具]
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发表于 2015-2-15 17:04 资料个人空间短消息加为好友

小中大

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原帖由 avi317 于 2015-2-15 17:02 发表 bbcodeurl('http://bbs.antpedia.com/images/common/back.gif', '%s')

产物回收后直接测序吗应该再以回收纯化后的DNA为模板做二次PCR

这样的话会不会特异性不太好，二次PCR？O(∩_∩)O谢谢~

131415[使用道具]
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发表于 2015-2-15 17:05 资料个人空间短消息加为好友

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