生物制药

大家好我主 要是按照药典上的方法液相或气相分析,现在的药典上的方法大多是内标,外标,或者自身对照,这样做了以后要根据对照峰面积和样品称量,才能得到最终结果.现在我就是在这些计算方面不大明白,哪位高手能帮我指点一上,不胜感激.

看药典附录后的色谱法介绍，里面都有公司，计算的基本原理是，在一定的浓度范围内，峰面积和大小与样品溶液浓度的大小成正比。

接药典上气相和液相原理的公式去套就可以了，然后要注意稀释倍数和单位一致

对的，药典上一般都是有公式的。论坛上也有很多这方面的资料。楼主，可以搜索一下。。

转载：气相色谱 内标法、外标法原理！最简单的图解法
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个人理解是：在仪器条件稳定的情况下，物质的量和峰面积成正比。而由于这种比照结果的误差会相对较大些，所以要求样品峰面积尽可能的和标样峰面积相近，换句话说就是要求样品中的目标组分含量与标样中的目标组分含量相近。
个人建议使用外标法就可以了，做个方法验证。这样整个操作流程会相对简单些。药典上的很多方法都很扯淡的。

看药典附录后的色谱法介绍，里面都有公司，计算的基本原理是，在一定的浓度范围内，峰面积和大小与样品溶液浓度的大小成正比。

　　杂质检查法

　　按药品标准规定的方法测定杂质的含量或限量时，如杂质对照品已经建立，则可按

　　规定用上述外标法进行测定;如杂质对照品没有建立，无法获得，或杂质未知，则可按下法测定。当供试品溶液的溶剂干扰供试品溶液的测定时，应取等体积溶剂进样，并将溶剂的背景色谱响应，从供试品溶液的色谱响应中扣除。

　　加校正因子的主成分自身对照法

　　在已知杂质在规定检测波长下的响应因子与主成分不一致的情况下，可采用加校正

　　因子的主成分自身对照法。在建立方法时，按各品种项下的规定，精密称(量)取杂质对照品和待测成分对照品各适量，配制测定杂质校正因子的溶液，进样，记录色谱图，按内标法以主成分为内标计算杂质的校正因子。此校正因子可直接载入各品种正文中，用于校正杂质的实测峰面积，再按照规定的方法计算杂质的含量。由于没有杂质对照品，应规定这类杂质峰的位置，如用相对于主成分的相对保留时间表示，还应进行方法耐用性考察，如采用 3根以上不同品牌的色谱柱同法测定各杂质的相对保留时间，RSD应小于5% 。

　　不加校正因子的主成分自身对照法

　　在杂质未知或未建立杂质对照品时，可采用不加校正因子的主成分自身对照法测定

　　杂质的含量或限量。测定杂质含量时，按各品种项下规定的杂质限度，将供试品稀释成与杂质限度相当的溶液作为对照溶液，进样，调节检测灵敏度(以噪音水平可接受为限)或进样量(以柱子不过载为限) ，使对照溶液中的主成分色谱峰高约达满量程的10-25%或其峰面积能准确积分(通常，含量低于 0.5%的杂质，峰面积的RSD应小

　　于10% ;含量在0.5-2% 的杂质，峰面积的RSD应小于5% ;含量大于2% 的杂质，峰面积的 RSD应小于2% ) 。然后，取供试品溶液和对照品溶液适量，分别进样，供试品溶液的记录时间除另有规定外，应为主成分保留时间的 倍，根据所得的供试品溶液中各杂质峰面积及其总和，按规定的方法计算杂质含量或限量。

举例：对照品称量M1，样品称量M2，对照品峰面积A1，样品峰面积A2。计算公式为含量=A2*M1/A1/M2

不管是杂质和主含量是不是这样算完还要乘以100%吧

峰面积比等于浓度比。内标法先计算校正因子