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标题:【求助】一种未知物质的柱层析分离

夕阳[使用道具]
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发表于 2015-2-21 21:15 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

【求助】一种未知物质的柱层析分离

我现在做一种未知物质的分离纯化，该物质粗品的紫外吸收大约在254-262之间，用H103大孔树脂进行柱层析分离，在254nm下检测吸收峰，50%的丙酮为洗脱液，可是洗脱过程中只要丙酮一出现，吸收值就很快上升到一个固定值，再也不变了！即便目标物质洗脱完毕，吸收值也不改变，所以想以紫外来确定分离效果的目标一直实现不了！郁闷中，请有经验的大牛指点一二！先谢谢了！
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vcve[使用道具]
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发表于 2015-2-21 21:17 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
是否丙酮试剂有污染，在254nm有吸收，可直接测定50%丙酮洗脱液的吸收值。
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夕阳[使用道具]
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发表于 2015-2-21 21:18 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
每次都是新配的丙酮做洗脱剂，不应该有污染啊！难道是所用容器的问题？我注意下！
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zhenxin[使用道具]
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发表于 2015-2-21 21:19 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
树脂用前处理过吗，有时候，填料会带进杂质
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bring[使用道具]
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发表于 2015-2-21 21:25 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
丙酮在紫外区有强吸收,你做个丙酮全波长扫描,分部收集后蒸去丙酮再测定,或用其它洗脱剂
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standbyme[使用道具]
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发表于 2015-2-21 21:27 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
50%的丙酮为洗脱液？怎么想到用这个洗脱的，H103大孔树脂我是没用过这个型号，但是50%的丙酮为洗脱液真是开眼界了，很可能是这个原因
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夕阳[使用道具]
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发表于 2015-2-21 21:30 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
树脂用前已认真做过处理了。用50%丙酮做洗脱液是经筛选确定的，洗脱效果较好。请楼上的大侠指点下，你们用洗脱液如何确定？常用哪些？多谢上面各位指点，还请继续赐教啊！
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dreaming[使用道具]
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发表于 2015-2-21 21:31 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
建议楼主试一下其它的检测方法。比如硫酸显色、碘熏等。
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