【求助】细胞免疫荧光 - 经验共享

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标题:【求助】细胞免疫荧光

misswu61[使用道具]
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发表于 2015-2-24 00:08 资料个人空间短消息加为好友

小中大

很明显，这不是膜定位，可以考虑抗体质量不行，或者串光了，你这个实验可以考虑不打孔，

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你好，可不可以说一下不是膜定位的原因？

misswu61[使用道具]
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发表于 2015-2-24 00:08 资料个人空间短消息加为好友

小中大

空白如此，要找找原因

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我一直在摸索，现在我都怀疑是一抗了。不过也有可以我自己技术不行，忽略了一些细节

bangqi_k[使用道具]
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发表于 2015-2-24 00:09 资料个人空间短消息加为好友

小中大

膜定位应该是细胞周围一圈的，你也可以用一些膜蛋白抗体做个共定位

gemei0115[使用道具]
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发表于 2015-2-24 00:09 资料个人空间短消息加为好友

小中大

你自己都分析出来了，我不认为是实验操作问题，你的实验组和对照组的荧光效果来看是一样的，在膜上都标记上了，只能说明你的蛋白非特异，之前的实验组做的有问题，再就是你的抗体有问题，国产的？特异性低！

misswu61[使用道具]
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发表于 2015-2-24 00:10 资料个人空间短消息加为好友

小中大

你自己都分析出来了，我不认为是实验操作问题，你的实验组和对照组的荧光效果来看是一样的，在膜上都标记上 ...

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你好，我买的抗体是santa cruz的

dreaming[使用道具]
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发表于 2015-2-24 00:10 资料个人空间短消息加为好友

小中大

你的绿色亮点应该是非特异性的是不是二抗不好？

misswu61[使用道具]
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发表于 2015-2-24 00:11 资料个人空间短消息加为好友

小中大

QUOTE:

原帖由 dreaming 于 2015-2-24 00:10 发表 bbcodeurl('http://bbs.antpedia.com/images/common/back.gif', '%s')
你的绿色亮点应该是非特异性的是不是二抗不好？

换了二抗结果还一样的

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