小中大细胞培养——细胞换液
【配制方法】
1)仪器准备
1000ml烧杯,玻璃棒,搅拌子,磁力搅拌器,高压灭菌输液瓶,高压灭菌的1mol/l的NaOH或HCL,滤器(内含0.22um的滤膜)
紫外超净工作台已准备的:酒精灯、镊子、废液缸、酒精棉球、玻璃吸管(或一次性塑料吸管或移液抢和枪头)
2)试剂
DMEM粉末、碳酸氢钠粉末、HEPES、NaOH 、HCL、HEPES、双抗
需高压灭菌的有磁力搅拌子、输液瓶、滤器、吸管、
蒸馏水
3)步骤
1.将一袋培养基全部倒入一容器中,用少量蒸馏水将袋内残留培养基洗下,并入容器,重复2-3次。加蒸馏水(水温20℃~30℃)到950毫升,轻微搅拌溶解。
2.加入2.438克碳酸氢钠
3.加HEPES 2.38 g
4.轻微搅拌溶解,加注射用水至1升。
5.用1mol / L 氢氧化钠溶液或 1mol / L盐酸溶液调pH至所需值。
6.用0.2μm滤膜正压过滤除菌。
7.每瓶200 ml, -20℃保存
8.需要配完全培养液时,先拿到4度冰箱,后拿到常温
200ml需加22ul的胎牛血清