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标题:【求助】求高手指点电泳结果，为什么有那么多重复的带？

王蜜蜜[使用道具]
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发表于 2015-3-10 11:08 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

【求助】求高手指点电泳结果，为什么有那么多重复的带？

前6个是别的实验，后面的条带是我做菌液pcr时跑出来的带，为什么有那么多重复的带？目标片段是1000bp的，之前做出来一次，用的是同样的程序，体系也没有变，为什么会出现这样的情况？跪求高手指点！


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发表于 2015-3-10 11:09 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

你这个照片不清晰啊，前六个条带都没跑出去，如果是琼脂糖凝胶电泳的话，你考虑一下换换别的琼脂糖，后面的条带不明显，不清晰，请问一下你做的体系是多少，20UL还是50UL，有的时候孔太大也有影响，不过主要我还是觉得琼脂糖的问题，或者是你的菌液没处理好，仅供参考。
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memory[使用道具]
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发表于 2015-3-10 11:09 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

什么都没有啊~
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 小中大

后边是菌液鉴定未成功吧/
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 小中大

菌液太浓了
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 小中大

菌落PCR根本没出带~~
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 小中大

假如是阳性克隆的PCR只做25cycles就够了，前几天鉴定出来的话直接提质粒检测算了
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nikonun[使用道具]
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发表于 2015-3-10 11:11 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

后面菌液PCR根本就没有特异性条带出现啊。
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PCR[使用道具]
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发表于 2015-3-10 11:11 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

第一，菌液加太多了 1ul就够了
第二，胶没有做好，
第三，克隆未成功。 鉴定完毕
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redbutterfly[使用道具]
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发表于 2015-3-10 11:11 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

可能是菌液浓度太高，后面几个点样孔为什么没有显光呢
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