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标题:【求助】PCR的电泳图不会分析，求教！

eric930[使用道具]
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发表于 2015-3-10 16:41 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

【求助】PCR的电泳图不会分析，求教！

第一个图是提取DNA的，第二个是pcr后的结果，请前辈们指导一下啊~


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2015-3-10 16:41
周三下午PCR结果第7.PNG (37.06 KB)
 
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any333[使用道具]
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发表于 2015-3-10 16:41 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

什么都没有给，怎么分析啊，能分析的人就真的是高手啦。
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sistis[使用道具]
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发表于 2015-3-10 16:41 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

什么都没有给，怎么分析啊，能分析的人就真的是高手啦。
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ritou1985[使用道具]
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发表于 2015-3-10 16:42 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

第一图是你样本提取的基因组吧？
第二图PCR结果是第一组模板分别对应的结果？
这个需要信息全一些，比如你的引物是什么，需要扩增的目的条带多大？体系是不是适合？因为你第二图虽然没有明显的很亮的目的带，但是还是有些有条带，当然应该也有非特异扩增。
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发表于 2015-3-10 16:42 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
PCR的图似乎扩出了多态性，否则就是引物的特异性不够，在250bp的PCR条带较为明显
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eric930[使用道具]
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发表于 2015-3-10 16:43 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大


QUOTE:
原帖由 ritou1985 于 2015-3-10 16:42 发表 bbcodeurl('http://bbs.antpedia.com/images/common/back.gif', '%s')

第一图是你样本提取的基因组吧？
第二图PCR结果是第一组模板分别对应的结果？
这个需要信息全一些，比如你的引物是什么，需要扩增的目的条带多大？体系是不是适合？因为你第二图虽然没有明显的很亮的目的带，但是还是有些有条带，当 ...

是的，第一个图是基因组提取，第二个PCR用的DNA和第一个没有关系，其他的信息我也不知道了……这个是教学实验的说，我还在读本科……谢谢你啦~
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发表于 2015-3-10 16:43 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

基因组提取的很好，但pcr无产物
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eric930[使用道具]
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发表于 2015-3-10 16:44 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大


QUOTE:
原帖由 u234 于 2015-3-10 16:43 发表 bbcodeurl('http://bbs.antpedia.com/images/common/back.gif', '%s')

基因组提取的很好，但pcr无产物

请问出现的很模糊的几个条带是什么呢？
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发表于 2015-3-10 16:44 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
基因组提取的不够纯，有少量的杂带，可能是质粒；关于PCR图，最下边每个泳道都有的条带是你的目的条带吗？如果这样那就是设计引物的问题了，引物特异性不够，所以导致杂带很多，建议重设计引物；如果设计的引物本身就是随机引物，那就应该考虑加大模板量，做个梯度PCR，检验一下那个退火温度下扩出来的条带清晰最亮，然后再做上边的PCR，才能得到你想要的结果！
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发表于 2015-3-10 16:44 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
请问出现的很模糊的几个条带是什么呢？

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是一些错配，如果你没有用coldingstar或者hottingstar一般都有很多错配，一般如果有目的产物，你产物会比较亮，其他错配相应会很少
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