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标题:【求助】大家帮忙看看我提DNA的电泳图...

雪花子[使用道具]
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【求助】大家帮忙看看我提DNA的电泳图...

这是我昨天提的DNA,提好后就开始的电泳,1%的胶,电压80V,电100分钟。不知道为什么会这样,跑前面的到底是什么啊?可以pcr没呢?


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2015-3-10 17:49
DNA电泳.jpg (13.54 KB)
 
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jude[使用道具]
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点样孔比较小,这样跑出来的图比较难看。那些条带是什么?
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原帖由 jude 于 2015-3-10 17:50 发表 bbcodeurl('http://bbs.antpedia.com/images/common/back.gif', '%s')

点样孔比较小,这样跑出来的图比较难看。那些条带是什么?

细菌染色体DNA
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ha111[使用道具]
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上面是基因组,下面是rna 或质粒啥的,不过你做的胶太那啥了,再练练基本功
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100分钟????如果是检测的话,电泳时间太长了,我实验室一般都是100V,跑个15——20min就可以了
标注一下各个泳道是什么呢?这样大家才能帮你看看
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雪花子[使用道具]
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因为是第一次做这个所以也不是很清楚,书上说72V电2~5h的所以就照电了那么久了,从左到右的话1,3,5是细菌组DNA,2,4,6是Marker.
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原帖由 雪花子 于 2015-3-10 17:51 发表 bbcodeurl('http://bbs.antpedia.com/images/common/back.gif', '%s')

因为是第一次做这个所以也不是很清楚,书上说72V电2~5h的所以就照电了那么久了,从左到右的话1,3,5是细菌组DNA,2,4,6是Marker.

1、maker貌似是DL2000,下次换个大一点的maker,比如Hind III之类
2、电泳时间太长。maker清晰分开,条带也清晰即可。一般15-30min。
3、有一些RNA或DNA降解。建议提取时或TE中加入RNase。
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QUOTE:
原帖由 雪花子 于 2015-3-10 17:51 发表 bbcodeurl('http://bbs.antpedia.com/images/common/back.gif', '%s')

因为是第一次做这个所以也不是很清楚,书上说72V电2~5h的所以就照电了那么久了,从左到右的话1,3,5是细菌组DNA,2,4,6是Marker.

首先要说的是如果片段大小都在一个Marker范围内就用不着点那么多Marker一个就足够了,其次你那个图片跑成这个结果很有可能是胶的问题,交没配好。
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7437654[使用道具]
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应该可以pcr的,上面的条带应该就是基因组,
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ujne[使用道具]
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电泳时间太长了,可以稀释后跑跑
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