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标题:【求助】AFLP产物银染条带很淡

nvdabing[使用道具]
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发表于 2015-3-11 15:35 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
这张是我上面跑变性胶的选扩电泳图片，大家帮忙分析下，造成银染条带的原因！


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2015-3-11 15:35
W1-2,R1-2选扩产物.tif.jpg (44.53 KB)
 
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nvdabing[使用道具]
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发表于 2015-3-11 15:35 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
这张是我上面跑变性胶的选扩电泳图片，大家帮忙分析下，造成银染条带的原因！


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2015-3-11 15:35
上面预扩产物，下面选扩.tif.jpg (129.03 KB)
 
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xingyi08[使用道具]
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发表于 2015-3-11 15:36 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

我们实验室的AFLP，希望对你有帮助


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AFLP.jpg (357.16 KB)
 
2015-3-11 15:36
选择性扩增检测.JPG (409.56 KB)
 
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小鱼鱼[使用道具]
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发表于 2015-3-11 15:36 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

你的染色方法确实比较繁琐啊，另外，应该不是PCR问题。因为你的都是有条带的，并不是没有。
这种情况建议你把PAGE胶重新配置下。很像是胶的问题啊。
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发表于 2015-3-11 15:37 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

估计应该在药品纯度，纯净水，上样量上改进吧！！
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mod=8048[使用道具]
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发表于 2015-3-11 15:37 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

刚刚我问过我们实验室做AFLP的人了，他也不知道问题出在那里。他说他以前做过稀释倍数对结果影响的实验，觉得稀释倍数跟结果没关系。
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dreaming[使用道具]
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发表于 2015-3-11 15:37 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
上面几个人说是胶的问题，我是觉得胶没有问题（marker跑得很好），我建议你跑的时候功率调小点（我们一般是60w），这样跑出来的条带会直一些，好读带。
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nvdabing[使用道具]
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发表于 2015-3-11 15:38 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
你的染色方法确实比较繁琐啊，另外，应该不是PCR问题。因为你的都是有条带的，并不是没有。
这种情况建议你 ...

====================================================

我也是这么认为的，那为什么我跑了好几块胶都是这个问题！快晕死了！
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nut6694[使用道具]
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发表于 2015-3-11 15:38 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大


QUOTE:
原帖由 nvdabing 于 2015-3-11 15:38 发表 bbcodeurl('http://bbs.antpedia.com/images/common/back.gif', '%s')
你的染色方法确实比较繁琐啊，另外，应该不是PCR问题。因为你的都是有条带的，并不是没有。
这种情况建议你 ...

====================================================

我也是这么认为的，那为什么我跑了好几块胶都是这个 ...

还是建议你把配制胶的各种试剂重新弄，应该是在配制上的
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nvdabing[使用道具]
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发表于 2015-3-11 15:38 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
非常感谢各位的指点，我跑出条带了，原来是我电泳和银染的温度问题，我在空调房里做的，预电泳温度达到55度才正式电泳，银染也是在空调房里面做的，跑的条带很好很漂亮，改天我把图贴上。在一个感谢大家的指导！！真心感谢！！！
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