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标题:【求助】AFLP产物银染条带很淡

fklo83[使用道具]
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你的步骤是什么啊,不同的配方结果就不一样
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nvdabing[使用道具]
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这是我在空调房做电泳,银染的图片,所用的AFLP产物就跟我求助的那张图片所用的一样,这张条带都分得很清楚了,就是颜色太淡,还需要改进,不知道哪位高手帮忙下!


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2015-3-11 15:54
AFLP (1).JPG (38.9 KB)
 
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nvdabing[使用道具]
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这是调成黑白的,不知道这张图片可不可以放到文章里面!


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AFLP (2).JPG (36.83 KB)
 
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ladyhuahua[使用道具]
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我最近也在跑AFLP,年前跑的还可以,但年后回来重新弄,选扩检测就很浅,大板跑不出条带,隐约可见很浅的,下次发下图片。
请问你显影的时候一般摇多长时间?我感觉摇了挺长时间的了,条带还是出不来。还有染色、显影过程用得都是ddH2O吗?我用的都是蒸馏水,不知道影响大不大?谢谢。
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xue258[使用道具]
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我银染过程全部不用摇晃,只要药品混匀就行,还有就是跑胶时候的温度一定要注意(室温25度以上,预电泳胶的温度一定要达到55度才开始正式电泳),我用的都是ddH2O,还有就是我是把硫代硫酸钠加到染色液里面,显影液不加!以下是我跑的结果!


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2015-3-11 15:55
DSC_0005.JPG (247.63 KB)
 
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zwsyrt[使用道具]
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不知道楼主还在不 我有很多问题想请教呢
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nvdabing[使用道具]
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QUOTE:
原帖由 zwsyrt 于 2015-3-11 15:55 发表 bbcodeurl('http://bbs.antpedia.com/images/common/back.gif', '%s')

不知道楼主还在不 我有很多问题想请教呢

你要问什么?我们一起探讨下,AFLP这东西不好做!
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wu11998866[使用道具]
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估计你应该已经解决了吧,很明显你的带太多了,看不出主次带了,稀释预扩产物,再增加点镁离子应该管用
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nvdabing[使用道具]
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QUOTE:
原帖由 wu11998866 于 2015-3-11 15:56 发表 bbcodeurl('http://bbs.antpedia.com/images/common/back.gif', '%s')
估计你应该已经解决了吧,很明显你的带太多了,看不出主次带了,稀释预扩产物,再增加点镁离子应该管用

我的是解决了,谢谢你宝贵的建议,就因为这个,差点延期!
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