食品分析者

我准备用紫外分光光度法测原花青素的含量，样品+香草醛+浓盐酸，在测基线时，是放两个空白的比色皿，还是装有香草醛+浓盐酸的比色皿，由于没有做过这方面的实验，很多基本的问题都不是很懂，请大家多给个意见。我是要做标准曲线的。（用的是JASCO V-550紫外可见分光光度计）

你是想做空白是吧？空白的话。。那肯定是草醛+浓盐酸的比色皿这个的。。。消除溶剂呀什么之类的影响

你是做检测化验的吗？
仔细看标准，他会告诉你用什么试剂作为空白和参比。

GBT 22244-2008 是有问题的。标线线性很差，正丁醇产生负峰与花青素主峰重叠。

这个真的不用，标准曲线本来就是在一个比较小的范围内存在线性关系。只做一次空白，后面的实验都是以这个空白为参照基准，如果每次都调基线，是不是没有一个统一的参照呢？

Mirecki RM, Teramura AH (1984). Effects of ultraviolet-B irradiation on soybean: V. The dependence of plants sensitivity on the photosynthetic photon flux density during and after leaf expansion. Plant Physiology, 74, 475–480.

那样不行，应保证和空白的总体积一样，期间的组分是可以变的。

当然是先放2个装有香草醛+浓盐酸的比色皿，在最大吸收波长下测的杯差，然后的第一个比色皿不动，把第二个比色皿拿出来，倒入待测液，测定它的吸光度，计算

我不知道你这个反应是在结果结束后测，还是测反应的过程。一般做标准曲线的时候，都是先取5支试管，依次编号空白，1,2,3,4。我猜你这三种物质里面应该是有着一种催化剂吧，另外两种物质是其反应的。例如你的空白是1ml甲醇+3ml香草醛+1.5ml盐酸，以这个过基线，那你的编号1可以设计成1ml甲醇+2.5ml香草醛+2ml盐酸，编号2可以设计成1ml甲醇+2ml香草醛+2.5ml盐酸，编号3可以设计成1ml甲醇+1.5ml香草醛+2.5ml盐酸，编号4可以设计成1ml甲醇+1ml香草醛+3.5ml盐酸。总之控制一个变量不变，另外两个，一个递增一个递减根据自己的需要，但是加入液体的总体积是应该保持不变的。严格的说做标准曲线的时候，反应的两物质两端是要见0的。