小中大1) 在冰乙酸存在的情况下,茴香胺会和油脂中的醛类物质发生反应。反应产物是淡黄色的,颜色的强度的形成不仅仅依靠醛类物质的数量,同时也和其结构有关。已经发现在碳链上如有和羰基共轭的双键存在,摩尔吸光度会增加4到5倍。这意味着产品如果含有2-烯和双烯,结果会高。
2) 在大多数情况下,正己烷可代替异辛烷作为溶剂。但是,那些脂肪酸氧化程度较高的油脂在正己烷中不能完全溶解,就必须使用异辛烷。实验中所使用的溶剂(异辛烷或正己烷),在300-380nm处的吸光度应是零或接近零。商业产品可以通过充满硅胶的玻璃柱(直径3-5cm,长度100cm)过滤来排除吸收性物质。
3) 茴香胺和醛类化合物的反应会生成水。因此,试剂或样品中如有水的存在会导致反应不完全,而是结果偏低。由于冰乙酸极易吸湿,有必要用Karl Fischer测定以来检测水分。如果水分含量超过0.1%,此冰乙酸应丢弃。
4) 储存过程中,由于氧化作用茴香胺会变黑。茴香胺晶体是奶油色的, 应储存黑色瓶中,于0–4°C条件下保存,避免暴露于强光,并在颜色改变前使用。变色的试剂可用下述方法脱色和还原。将4.0g茴香胺溶解于100mL75°C的水中,加入0.2g亚硫酸钠和2.0g活性炭,搅拌5min。通过双层滤纸过滤,如果有活性炭通过,再重新过滤。将滤液冷却到0°C左右,在此温度下保持4小时,或过夜更好。将茴香胺晶体过滤出来,并用少量0°C的水冲洗。在真空干燥器中进行干燥,然后装入棕色瓶中。如果在暗处低温保存,得到的晶体在1年内不会变黑。
5) 茴香胺溶液在350nm处吸光度如果超过0.200时,应丢弃。
6) 混合物必须通过小幅度的振摇使其完全均质,然后在测量吸光度之前反应10分钟。