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标题:[未解决]吸光度只比空白本底的高0.015左右求帮助~

  [未解决]本主题悬赏 可用分 10  
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发表于 2015-3-15 01:31 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

吸光度只比空白本底的高0.015左右求帮助~

这两天在做还原力测定的实验，可是加入氯化铁后，总是产生沉淀，我的氯化铁是0.1%的，我也把样品稀释了，稀释到25倍时，溶液刚开始很清，可是后来又出现了细微沉淀，而且在这个条件下测定的吸光度只比空白本底的高0.015左右。大家有相关的经验和建议吗？
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发表于 2015-3-15 01:31 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
1ml样液+2.5ml,0.2mol/l,PBS,PH6.6+2.5ml 1% 铁氰化钾。
混匀 50摄氏度，20min
冷却，+2.5ml 10%三氯乙酸，离心10min
上清液2.5ml+2.5ml水+0.5ml 0.1%三氯化铁
混匀
700nm,蒸馏水调零
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发表于 2015-3-15 01:34 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
重新配制铁氰化钾吧，感觉不太容易沉淀。这个东西好像是现配现用效果比较好
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发表于 2015-3-15 01:36 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
铁氰化钾是按以前的浓度配制还是降低浓度？后来看到还原力测定的原理就是样品还原铁氰化钾，然后还原产物与Fe3+反应生成普鲁士蓝，普鲁士蓝在水里溶解度很低，样品浓度一高就会出沉淀，我后面做的时候都是降低样品浓度，无赖之举
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mico_11[使用道具]
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发表于 2015-3-15 01:38 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
同样的浓度，不过现配现用，效果的确好很多，没有之前的沉淀现象，蓝色均匀透明，其他的实验条件一样。这是个人经验，我也不知道为什么会这样
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花花[使用道具]
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发表于 2015-3-15 01:39 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
我现在要测黄酮的还原性，也是按照这个方法测的，、但是我不知道PBs的ph0.2mol/l,PBS,PH6.6怎么配的，能告诉我吗？？
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发表于 2015-3-15 01:41 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

回复 #6 花花 的帖子

这个我做过的：首先分别配制0.2mol/L的磷酸二氢钠和磷酸氢二钠溶液，再将62.5mL的磷酸二氢钠和37.5mL的磷酸氢二钠混合均匀即可！
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