样品前处理

最近在做细菌脂肪酸的提取和测定，需要将脂肪酸甲酯化后跑GC-MS，查阅了相关的文献，发现用的最多的是Morrison and Smith（1964）的方法，即三氟化硼甲醇溶液甲酯化，文献中有这么一段话
Boron fluoride-methanol reagent was added under nitrogen, in the proportions 1 ml reagent per 4-16 mg of lipid, and the tube was closed with the screw cap. The tube was then heated in a boiling water bath for the requisite time, cooled, and opened. The esters were extracted by adding 2 volumes of pentane, then 1 volume of water, shaking briefly, and centrifuging until both layers were clear.
三氟化硼不是和水剧烈反应么，这里加水会不会和三氟化硼反应啊

还有就是这篇文献就是将三氟化硼甲醇溶液加到脂肪酸里拧上盖子100摄氏度水浴2min就可以，这和国标用冷凝管回流什么的简化了不少，能达到良好的甲酯化效果么，我看到有的文献还有在瓶子里拧上盖子100度水浴40min的 = =

第一次做相关的实验完全没经验啊，大神们求解答啊，谢谢谢谢

就是把东西放在一个密闭的反应釜里100摄氏度水浴2min，不行再延长时间啊，我们实验室做脂肪酸甲酯化是25到40分钟，不过工艺和你的不一样

好像也不是反应釜，文献中就写着 capped reaction vial 或者干脆就是centrifuge tube 中，这个反应危险或者对条件要求很高么，用反应釜么

加水时，三氟化硼和水反应没关系，甲酯化反应已经完成。加水为更好分层。

这个溶于甲醇的三氟化硼和水反应不会很剧烈么

除了摸索衍生过程外，也可以考虑GC-NPD检测器做做试试。

三氟化硼和甲醇是一种稳定的络合物，性质与三氟化硼是不一样的

也就是像三氟化硼甲醇溶液中加水也不会观察到明显的反应么？

我们做脂肪酸甲酯化反应就用的是三氟化硼甲醇溶液，回流反应30Min左右，基本上就甲酯化完成了，我们的碳链分布一般是10.12.14.16.18的居多，个人感觉反应很好进行，然后用异辛烷萃取，饱和的食盐水洗涤几次，然后跑气相，用的是HP-INNOWAX柱子，分离效果很好的，不知道对楼主有没有帮助。

三氟化硼是做催化剂的，而管子要用耐压高温水解管才行