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标题:[未解决]做完一种浓度而后做下一个浓度之间也要冲洗这么久吗？

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outeer[使用道具]
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发表于 2015-3-27 23:15 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

做完一种浓度而后做下一个浓度之间也要冲洗这么久吗？

各位大神  恳请帮助
最近在做反向离子对色谱
看到文献上说柱子做过离子对之后至少要冲一个小时以上
我的实验需要优化离子对试剂的浓度，做完一种浓度而后做下一个浓度之间也要冲洗这么久吗？

另外，水相原本是乙酸-乙酸铵的缓冲溶液（均0.1M）,而离子对可能会对流动相的pH稍有影响，需要在配制完不同浓度含离子对试剂的缓冲液后调整pH吗？

越做实验越来越发现色谱知识博大精深啊，自己才只是学了个皮毛而已，求各位大神慷慨帮助，不胜感激！
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冰@舟[使用道具]
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发表于 2015-3-27 23:15 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
连续优化离子对试剂的浓度不需要冲洗1 h的，柱子用过离子对试剂之后，比较难冲洗干净，才用长时间冲洗。但是一般用过离子对试剂的柱子就专门用来做离子对色谱了。
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XXXX111[使用道具]
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发表于 2015-3-27 23:18 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
缓冲体系在其缓冲范围之内，一般不需要重新调节pH值的。
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差不多先生[使用道具]
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发表于 2015-3-27 23:20 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

回复 #3 XXXX111 的帖子

请教一下，您一般离子对试剂的流动相平衡柱子多久呢？我做离子对试剂的种类和浓度优化，每变化一次条件都要重新平衡很久吗？
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孤独的渔夫[使用道具]
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发表于 2015-3-27 23:22 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

回复 #4 差不多先生 的帖子

一般来讲需要比正常的反相色谱平衡时间至少长一倍~150 mm柱子至少30 min。如果是换离子对试剂种类的话，重新平衡也需要30 min以上。同样的离子对试剂仅仅是浓度改变的话，可以适当减短一点~
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