【求助】 SSR-PCR图怎么这样啊？怎么改进能让条带清晰一点？

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标题:【求助】 SSR-PCR图怎么这样啊？怎么改进能让条带清晰一点？

薄荷侠[使用道具]
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发表于 2015-3-30 11:25 资料个人空间短消息加为好友

小中大

我用的3%琼脂糖凝胶检测的，pcr体系是20Ul的，怎么改进能让条带清晰一些？

附件

2015-3-30 11:25

28EX__V%E(M07L0P]OK`R8C.jpg (9.65 KB)

2015-3-30 11:25

2012.4.20pcr1-5.jpg (35.5 KB)

remenb[使用道具]
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发表于 2015-3-30 11:25 资料个人空间短消息加为好友

小中大

这电泳跑得也太差了，多练练基本功吧。

dreaming[使用道具]
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发表于 2015-3-30 11:26 资料个人空间短消息加为好友

小中大

点样孔里的是荧光吗? 你是准备去测序了吧？

wanglaoshi[使用道具]
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发表于 2015-3-30 11:26 资料个人空间短消息加为好友

小中大

QUOTE:

原帖由 薄荷侠 于 2015-3-30 11:25 发表 bbcodeurl('http://bbs.antpedia.com/images/common/back.gif', '%s')
我用的3%琼脂糖凝胶检测的，pcr体系是20Ul的，怎么改进能让条带清晰一些？

点样点的不行啊！

月牙牙[使用道具]
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发表于 2015-3-30 11:26 资料个人空间短消息加为好友

小中大

制胶的时候配平了吗？

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发表于 2015-3-30 11:29 资料个人空间短消息加为好友

小中大

3%琼脂糖浓度高了吧？我都是用0.8%-1%的。而且煮胶要注意使其完全融化，不然会影响PCR产物的电泳效果。

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发表于 2015-3-30 11:29 资料个人空间短消息加为好友

小中大

跑胶只用1%的，纯化胶1.5%。你配胶不行，那Maker都看不清

中国特色[使用道具]
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发表于 2015-3-30 11:29 资料个人空间短消息加为好友

小中大

应该是核酸染料分解了，加核酸燃料时琼脂糖温度不能太高的，高温会挥发降解，那可是剧毒啊