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标题:【求助】液相峰分不开

碎星星[使用道具]
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【求助】液相峰分不开

最近想要分离分离纯化由甲醇提取的次生代谢物,但跑HPLC时,想要的那两个物质的峰始终分不开(如图红色箭头所示处)。
图一和图二是同一样品在不同洗脱条件下跑的结果:
其中图一是由甲醇/水=15/85恒定比例洗脱,图二是甲醇/水梯度洗脱, 其条件如下:
前两分钟  100%水洗,
2-30分钟 由100%水洗逐渐变为85%水洗。
可以看到我想要的那两个峰还是在甲醇/水=15/85处洗脱下来,但始终分不开。
我的样品是甲醇溶液,样品在水溶液中时那两个峰很低,说明那两个峰的物质在甲醇中的溶解性比水中好。
恳请各位大侠帮我支支招,如何才能把这两个峰分开。
先谢谢各位啦!
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DONT[使用道具]
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你可以选择乙腈-水系统试试看,我觉得你可以试试这个比例的洗脱,毕竟这样时间比较快
前5分钟  乙腈-水  30:70,
5-30分钟 洗逐渐变为乙腈-水  15:85
30.01之后保持乙腈-水  10::90的比例
或者直接走等度乙腈-水  15:85这样子只是时间长些,肯定是可以分开的
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milkdog[使用道具]
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貌似以甲醇-水系统很难分开此两物质,不知乙腈-水系统用梯度洗脱的结果怎么样。
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is2011[使用道具]
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