小中大【求助】液相峰分不开
最近想要分离分离纯化由甲醇提取的次生代谢物,但跑HPLC时,想要的那两个物质的峰始终分不开(如图红色箭头所示处)。
图一和图二是同一样品在不同洗脱条件下跑的结果:
其中图一是由甲醇/水=15/85恒定比例洗脱,图二是甲醇/水梯度洗脱, 其条件如下:
前两分钟 100%水洗,
2-30分钟 由100%水洗逐渐变为85%水洗。
可以看到我想要的那两个峰还是在甲醇/水=15/85处洗脱下来,但始终分不开。
我的样品是甲醇溶液,样品在水溶液中时那两个峰很低,说明那两个峰的物质在甲醇中的溶解性比水中好。
恳请各位大侠帮我支支招,如何才能把这两个峰分开。
先谢谢各位啦!