【求助】配PCR体系taq酶为什幺要最后加入

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标题:【求助】配PCR体系taq酶为什幺要最后加入

铜雀[使用道具]
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发表于 2015-4-1 15:22 资料个人空间短消息加为好友

小中大

请问在pcr配体系的时候taq酶为什么样最后加入

二丫头466[使用道具]
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发表于 2015-4-1 15:22 资料个人空间短消息加为好友

小中大

一般来说，PCR选择冷启动，如果酶先加入，再加其他比如引物、模板，实际上这个时候酶已经催化反应了，很容易出现杂带
二则是酶一般保存在-20度，拿出来即使放在冰上操作也很难达到-20度的效果酶活性会降低，影响PCR的效果。
有时候时间稍长甚至P不出来东西
所以嘛一般最后一步才加酶
我晓得的就这么多咯。。。

白白的[使用道具]
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发表于 2015-4-1 15:22 资料个人空间短消息加为好友

小中大

保证酶活，排除其它干扰，且应在冰上操作

jujuba[使用道具]
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发表于 2015-4-1 15:23 资料个人空间短消息加为好友

小中大

是需要最后才加入，加的比引物早容易形成引物之间的二聚体。