PCR仪 » 讨论区 » 经验共享 » 【求助】如果一个引物对的两条引物的Tm值不一样，PCR中...

采购询价

点击提交代表您同意 《用户服务协议》 《隐私政策》

 19  1/2 12››
 
需要登录并加入本群才可以回复和发新贴
打印 | 推荐 | 订阅 | 收藏

标题:【求助】如果一个引物对的两条引物的Tm值不一样，PCR中...

fei1226com[使用道具]
四级
Rank: 4


UID 79957
精华 0
积分 599
帖子 898
信誉分 100
可用分 5286
专家分 0
阅读权限 255
注册 2011-12-18
状态 离线
1

发表于 2015-4-1 16:48 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

【求助】如果一个引物对的两条引物的Tm值不一样，PCR中...

请教各位师兄师姐：如果一个引物对的两条引物的Tm值不一样，pcr中的Tm值应该参照那个呢？是比较高的还是比较低的？多谢！
顶部
jude[使用道具]
四级
Rank: 4


UID 72164
精华 1
积分 599
帖子 754
信誉分 102
可用分 4721
专家分 10
阅读权限 255
注册 2011-9-5
状态 离线
2

发表于 2015-4-1 16:48 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大


QUOTE:
原帖由 fei1226com 于 2015-4-1 16:48 发表 bbcodeurl('http://bbs.antpedia.com/images/common/back.gif', '%s')
请教各位师兄师姐：如果一个引物对的两条引物的Tm值不一样，pcr中的Tm值应该参照那个呢？是比较高的还是比较低的？多谢！

低的
顶部
IAM007[使用道具]
三级
Rank: 3Rank: 3


UID 75217
精华 0
积分 464
帖子 608
信誉分 100
可用分 3861
专家分 0
阅读权限 255
注册 2011-10-20
状态 离线
3

发表于 2015-4-1 16:48 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

我觉得你最好用温度梯度来先确定最适的退火温度，这样就可以节省时间。
顶部
feiya[使用道具]
三级
Rank: 3Rank: 3


UID 117889
精华 0
积分 247
帖子 234
信誉分 100
可用分 1911
专家分 0
阅读权限 255
注册 2013-12-7
状态 离线
4

发表于 2015-4-1 16:48 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

温度梯度？什么意思呢？多谢啊？
顶部
dog002[使用道具]
四级
Rank: 4


UID 76386
精华 0
积分 916
帖子 1452
信誉分 100
可用分 8133
专家分 0
阅读权限 255
注册 2011-11-4
状态 离线
5

发表于 2015-4-1 16:49 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
touchdown就是每一个循环降低一点温度，最后到达目标温度大量扩增，可以百度搜索具体操作
顶部
dog002[使用道具]
四级
Rank: 4


UID 76386
精华 0
积分 916
帖子 1452
信誉分 100
可用分 8133
专家分 0
阅读权限 255
注册 2011-11-4
状态 离线
6

发表于 2015-4-1 16:49 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
温度梯度是某些PCR仪器带的功能，随着列数的不同，温度有变化
顶部
mimili_901[使用道具]
四级
Rank: 4


UID 73543
精华 0
积分 564
帖子 723
信誉分 102
可用分 4458
专家分 20
阅读权限 255
注册 2011-9-24
状态 离线
7

发表于 2015-4-1 16:49 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

我们一般是取平均值！最好是做个梯度
顶部
xue258[使用道具]
四级
Rank: 4


UID 75643
精华 0
积分 746
帖子 1171
信誉分 100
可用分 6696
专家分 0
阅读权限 255
注册 2011-10-26
状态 离线
8

发表于 2015-4-1 16:50 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

一般取低的
顶部
圆圆圈圈[使用道具]
三级
Rank: 3Rank: 3


UID 71225
精华 0
积分 177
帖子 114
信誉分 100
可用分 1281
专家分 0
阅读权限 255
注册 2011-8-23
状态 离线
9

发表于 2015-4-1 16:50 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
最好做梯度，我就是这样做的
顶部
大白菜[使用道具]
三级
Rank: 3Rank: 3


UID 76277
精华 0
积分 230
帖子 220
信誉分 100
可用分 1831
专家分 0
阅读权限 255
注册 2011-11-3
状态 离线
10

发表于 2015-4-1 16:51 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
取低的吧
顶部
 19  1/2 12››