PCR仪 » 讨论区 » 经验共享 » 【求助】改变什么条件才能使条带清晰

采购询价

点击提交代表您同意 《用户服务协议》 《隐私政策》

 14  1/2 12››
 
需要登录并加入本群才可以回复和发新贴
打印 | 推荐 | 订阅 | 收藏

标题:【求助】改变什么条件才能使条带清晰

薄荷侠[使用道具]
三级
Rank: 3Rank: 3


UID 79372
精华 0
积分 186
帖子 112
信誉分 100
可用分 1311
专家分 0
阅读权限 255
注册 2011-12-10
状态 离线
1

发表于 2015-4-1 17:38 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

【求助】改变什么条件才能使条带清晰

改变什么条件才能使条带清晰


查看积分策略说明
附件
2015-4-1 17:38
840.jpg (265.95 KB)
 
顶部
xevin[使用道具]
四级
Rank: 4


UID 76455
精华 0
积分 799
帖子 1176
信誉分 101
可用分 6807
专家分 10
阅读权限 255
注册 2011-11-5
状态 离线
2

发表于 2015-4-1 17:38 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

有杂带，可以适当降低胶的厚度，新配电泳液，配胶的电泳液要和电泳槽里面的电泳液相同，增加胶的浓度，可以配2~2.5%的胶，保持电压稳定
顶部
qianqin1977[使用道具]
三级
Rank: 3Rank: 3


UID 75849
精华 0
积分 370
帖子 460
信誉分 100
可用分 3076
专家分 0
阅读权限 255
注册 2011-10-28
状态 离线
3

发表于 2015-4-1 17:38 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
应该是胶的问题，降低电压试试？？
顶部
xyw5[使用道具]
四级
Rank: 4


UID 75137
精华 1
积分 620
帖子 815
信誉分 102
可用分 4991
专家分 10
阅读权限 255
注册 2011-10-19
状态 离线
4

发表于 2015-4-1 17:39 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

DNA很杂吧，你看你的Marker跑的很漂亮
顶部
xyw5[使用道具]
四级
Rank: 4


UID 75137
精华 1
积分 620
帖子 815
信誉分 102
可用分 4991
专家分 10
阅读权限 255
注册 2011-10-19
状态 离线
5

发表于 2015-4-1 17:39 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
试想一下啊，我也不清楚，一起学习。你的Marker在大的bp的时候，条带还是比较清楚的，但是对于小的bp就开始模糊了，如果胶的浓度高的话，条带会压得更细，条带之间也会紧密一些，你加大浓度试一试。我跟你一起学习啊
顶部
pulala[使用道具]
三级
Rank: 3Rank: 3


UID 107976
精华 0
积分 288
帖子 315
信誉分 100
可用分 2326
专家分 0
阅读权限 255
注册 2013-4-27
状态 离线
6

发表于 2015-4-1 17:40 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
胶放反了吧？
顶部
SO2[使用道具]
三级
Rank: 3Rank: 3


UID 118006
精华 0
积分 355
帖子 369
信誉分 100
可用分 2696
专家分 0
阅读权限 255
注册 2013-12-9
状态 离线
7

发表于 2015-4-1 17:40 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

我最近也出现这样的问题，感谢了
顶部
BUK[使用道具]
四级
Rank: 4


UID 74485
精华 0
积分 521
帖子 701
信誉分 100
可用分 4361
专家分 0
阅读权限 255
注册 2011-10-11
状态 离线
8

发表于 2015-4-1 17:40 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
用的什么染料，推荐用EB，会比较清晰些，要sybr green的话，会模糊一些。
顶部
dog002[使用道具]
四级
Rank: 4


UID 76386
精华 0
积分 916
帖子 1452
信誉分 100
可用分 8133
专家分 0
阅读权限 255
注册 2011-11-4
状态 离线
9

发表于 2015-4-1 17:41 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

估计是胶的问题吧
顶部
49888[使用道具]
四级
Rank: 4


UID 77494
精华 0
积分 776
帖子 1211
信誉分 100
可用分 6906
专家分 0
阅读权限 255
注册 2011-11-17
状态 离线
10

发表于 2015-4-1 17:41 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

电泳无外乎3个问题。第一，就是胶的问题，像拔梳子过早，缓冲液不对（用水做胶更糟糕），但是看你的电泳结果中maker非常好，说明胶本身是没问题；第二，就是PCR产物本身的问题，如退火温度不合适可能产生非特异性条带，产生弥散的条带，像你的电泳结果就有这样的现象，在目标条带上下都有弥散，所以你可以试着提高退火温度；第三，就是一些其他因素，例如你使用的loading buffer，染料等，例如楼上说EB的结果好一样。  我的感觉就是，你本身的PCR有一定的问题，建议调整一下，试一试。
顶部
 14  1/2 12››