食品分析者

我最近投了一篇文章，内容主要涉及两种物质中的蛋白质(两种蛋白质都是混蛋白)之间的相互作用，审稿人看过后给的意见是可以用一些光谱方法来分析两种蛋白质相互作用中的二硫键与二级结构的变化，比如红外和拉曼。拉曼这种方法，我不是很熟悉，红外，略懂一点点。我的疑问是，红外好像最好研究一种蛋白质在不同处理中的二级结构的变化，对于两种蛋白质来说，意义大么？并且，如果我想用红外看二硫键的变化，那我必须得定量，但我们学校的红外对于固体来说好像不能定量，所以我觉得我的实验不能用红外做，但是，毕竟国外的审稿人都是大牛，别人肯定有他们的想法，所以，问题来了，请大家帮我分析下，我到底能不能用红外的方法来研究我的两种物质中的蛋白质之间的相互作用而导致的二硫键与二级结构的变化，另外，拉曼的方法是不是更适合我的实验一些？
小妹怀着一颗无比诚挚的心静等大家的帮助！！！！！！！！！

圆二色谱，红外、拉曼都可以的~ 拉曼光谱可以表征到二硫键，然后电泳或者常规方法结合验证~

我做的是固体粉末，不能用圆二色谱的吧；红外真的可以用来检测两种蛋白质在不同处理后的二级结构的变化么，我看的大都只是一种蛋白质的变化；电泳和高效那些实验我都做了，就差这一类的实验了；我还想请教下，我看的不同的文献中同一种蛋白质二级结构的波段都不同，只有1600~1700这个大的波段是一样的，我想问下，二级结构中的螺旋or折叠这些结构的波段有没有一个确定的方法啊，感觉就跟猜一样的，不好意思，又要麻烦你看这么多字了

红外不能单独表征二级结构，它是模糊的酰胺峰区

不可以将你的样品溶解在缓冲液后用CD谱测吗？（保证溶液态的结构稳定）

圆二色从原理上面来说，就没有太大的意义。他是在单一的蛋白晶形上面测出来的，对于你这种不太适用！！！！后面你去网站上面拟合的时候用的是蛋白质1还是蛋白质2的呢？？

你可以测一下结合常数之类的，结构可以不用表征，你这就类似于抗原抗体。。两种蛋白相互作用？

我的蛋白是很能难溶解的，遇水则成团，缓冲液也不能完全溶解，只能溶解分子量小的 咋办呢

这两种蛋白都是多聚体大蛋白，在热处理下，会相互结合，这种结合有二硫键也有非二硫键的作用，现在我文章的审稿人就想让我用一些光谱分析法来分析下这些蛋白在热处理时的二级结构及二硫键的变化，加深理解

用一种蛋白质做的，就用那种蛋白质拟合，用混蛋白做的，就一起拟合的……