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标题:[未解决]分析isospinosin , spinosin

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yangst85[使用道具]
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楼主是不是检测波长低于230nm啊?
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QUOTE:
原帖由 lxycxf 于 2011-3-27 21:48 发表 bbcodeurl('http://bbs.antpedia.com/images/common/back.gif', '%s')
在用HPLC-UV分析 isospinosin,,, spinosin  。首先,这两个化合物是7位和8位的取代基位置互换,其他都一样。在甲醇-水流动相中能分离开,洗脱梯度为70%aq-0;时间为0-60min,出峰时间大概在30多分钟。但是基线漂移很严重。换乙 ...

LS说的对与UV的波长有关. 可以换一波长看一看.
如果这种现象重复出现在每一次进样中, 也可以用减背景的方法来解决. 就是先做一空白背景谱, 然后在样品分析时, 减去空白背景就可以了.
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lxycxf[使用道具]
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首先很感谢大家的积极建议。 由于我的样品至少需要检测5个峰以上,所以,检测范围比较宽。用70%水:30甲醇-0%水:100%甲醇,时间:0-60min。大概10min左右出的第一个峰是需要的,然后20min左右是第二个峰。接着就是30min多分钟出现好多峰,有很严重重叠,其中isospinosin ,spinosin就是在这里,但是分开了。然后50多分钟出现的jujubosideA也是需要的。所以,样品中需要测的化合物极性好像差别比较大。 基线漂移,我估计是因为梯度比较陡。所以换成乙腈和水系统。 为了摸索isospinosin ,spinosin 分离的条件,就这两个化合物进样,梯度范围为25%乙腈-50%乙腈,0-30min, 出峰 时间24min左右,分离度0.5, 不能完全分离, 于是降低乙腈浓度,为20%乙腈-50%乙腈,时间不变,结果分离度差不多。出峰时间延长接近30min.
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首先很感谢大家的积极建议。 由于我的样品至少需要检测5个峰以上,所以,检测范围比较宽。用70%水:30甲醇-0%水:100%甲醇,时间:0-60min。大概10min左右出的第一个峰是需要的,然后20min左右是第二个峰。接着就是30min多分钟出现好多峰,有很严重重叠,其中isospinosin ,spinosin就是在这里,但是分开了。然后50多分钟出现的jujubosideA也是需要的。所以,样品中需要测的化合物极性好像差别比较大。 基线漂移,我估计是因为梯度比较陡。所以换成乙腈和水系统。 为了摸索isospinosin ,spinosin 分离的条件,就这两个化合物进样,梯度范围为25%乙腈-50%乙腈,0-30min, 出峰 时间24min左右,分离度0.5, 不能完全分离, 于是降低乙腈浓度,为20%乙腈-50%乙腈,时间不变,结果分离度差不多。出峰时间延长接近30min.
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首先很感谢大家的积极建议。 由于我的样品至少需要检测5个峰以上,所以,检测范围比较宽。用70%水:30甲醇-0%水:100%甲醇,时间:0-60min。大概10min左右出的第一个峰是需要的,然后20min左右是第二个峰。接着就是30min多分钟出现好多峰,有很严重重叠,其中isospinosin ,spinosin就是在这里,但是分开了。然后50多分钟出现的jujubosideA也是需要的。所以,样品中需要测的化合物极性好像差别比较大。 基线漂移,我估计是因为梯度比较陡。所以换成乙腈和水系统。 为了摸索isospinosin ,spinosin 分离的条件,就这两个化合物进样,梯度范围为25%乙腈-50%乙腈,0-30min, 出峰 时间24min左右,分离度0.5, 不能完全分离, 于是降低乙腈浓度,为20%乙腈-50%乙腈,时间不变,结果分离度差不多。出峰时间延长接近30min.
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回复 #10 PURPOSE人生 的帖子

首先很感谢大家的积极建议。 由于我的样品至少需要检测5个峰以上,所以,检测范围比较宽。用70%水:30甲醇-0%水:100%甲醇,时间:0-60min。大概10min左右出的第一个峰是需要的,然后20min左右是第二个峰。接着就是30min多分钟出现好多峰,有很严重重叠,其中isospinosin ,spinosin就是在这里,但是分开了。然后50多分钟出现的jujubosideA也是需要的。所以,样品中需要测的化合物极性好像差别比较大。 基线漂移,我估计是因为梯度比较陡。所以换成乙腈和水系统。 为了摸索isospinosin ,spinosin 分离的条件,就这两个化合物进样,梯度范围为25%乙腈-50%乙腈,0-30min, 出峰 时间24min左右,分离度0.5, 不能完全分离, 于是降低乙腈浓度,为20%乙腈-50%乙腈,时间不变,结果分离度差不多。出峰时间延长接近30min.
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原帖由 semxuxu 于 2011-3-28 12:02 发表 bbcodeurl('http://bbs.antpedia.com/images/common/back.gif', '%s')
出峰时间有点晚,调到十五分钟左右比较好,可能是你梯度变化比较大吧,这样容易基线不稳。还是用甲醇-水系统吧。再有如果结构比较稳定的话,可以加点酸或碱。 ...

首先很感谢大家的积极建议。 由于我的样品至少需要检测5个峰以上,所以,检测范围比较宽。用70%水:30甲醇-0%水:100%甲醇,时间:0-60min。大概10min左右出的第一个峰是需要的,然后20min左右是第二个峰。接着就是30min多分钟出现好多峰,有很严重重叠,其中isospinosin ,spinosin就是在这里,但是分开了。然后50多分钟出现的jujubosideA也是需要的。所以,样品中需要测的化合物极性好像差别比较大。 基线漂移,我估计是因为梯度比较陡。所以换成乙腈和水系统。 为了摸索isospinosin ,spinosin 分离的条件,就这两个化合物进样,梯度范围为25%乙腈-50%乙腈,0-30min, 出峰 时间24min左右,分离度0.5, 不能完全分离, 于是降低乙腈浓度,为20%乙腈-50%乙腈,时间不变,结果分离度差不多。出峰时间延长接近30min.
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回复 #16 lxycxf 的帖子

如果你要分离的两个化合物是异构体的话,甚至手型异构体,那这个方法可能很不好建立。
即使你能勉强做到基线分离,可能方法的耐用性也要打折扣的。
手性拆分,还是手性柱给力啊!
祝好运!
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回复 #18 PURPOSE人生 的帖子

不是手性,不过7,8 位的取代基有一点差别。
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lxycxf[使用道具]
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回复 #12 maicaixiaogu 的帖子

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