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标题:【求助】求助PCR产物胶回收的问题

乌贼老弟[使用道具]
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【求助】求助PCR产物胶回收的问题

跑完pcr后进行胶回收,电泳时目的条带很亮,但是回收后却一点目的条带也没有,用的回收试剂盒是天根的,胶、电泳槽都没有问题,请问下大虾门,这是肿么回事啊?我都回收了5次了。。。万分感谢呀@
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XYZQ[使用道具]
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回收验证 加的量少  你多加点样 再验证下
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换个试剂盒试试
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锤子[使用道具]
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是不是溶胶的时候没有变冷就往下做了,我实验室前阵子用的一个试剂盒,加binding buffer溶胶的时候颜色会变紫色,收不到DNA,加醋酸钠变回浅黄色就没问题了。
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vvmmoy[使用道具]
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QUOTE:
原帖由 锤子 于 2015-4-2 09:57 发表 bbcodeurl('http://bbs.antpedia.com/images/common/back.gif', '%s')
是不是溶胶的时候没有变冷就往下做了,我实验室前阵子用的一个试剂盒,加binding buffer溶胶的时候颜色会变紫色,收不到DNA,加醋酸钠变回浅黄色就没问题了。
...

pH值会影响吗?
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laughing妹[使用道具]
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PH影响非常大的  调回浅黄色就可以了
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bs4665[使用道具]
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溶胶彻底吗?还有加bufferB时要确定完全混匀?还不行的话,就换个试剂盒试试吧
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乌贼老弟[使用道具]
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QUOTE:
原帖由 bs4665 于 2015-4-2 09:58 发表 bbcodeurl('http://bbs.antpedia.com/images/common/back.gif', '%s')
溶胶彻底吗?还有加bufferB时要确定完全混匀?还不行的话,就换个试剂盒试试吧

溶胶彻底了,差不多十分钟,有可能是试剂盒的问题,哎哎,谢谢呀!
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乌贼老弟[使用道具]
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原帖由 XYZQ 于 2015-4-2 09:56 发表 bbcodeurl('http://bbs.antpedia.com/images/common/back.gif', '%s')
回收验证 加的量少  你多加点样 再验证下

应该不是点样的问题,就算浓度很低,也应该有微弱条带
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乌贼老弟[使用道具]
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原帖由 laughing妹 于 2015-4-2 09:58 发表 bbcodeurl('http://bbs.antpedia.com/images/common/back.gif', '%s')

PH影响非常大的  调回浅黄色就可以了  

请问下漂洗液的影响大不大啊?
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