PCR仪 » 讨论区 » 经验共享 » 【求助】PCR新手不懂，请求高手解答。。。

采购询价

点击提交代表您同意 《用户服务协议》 《隐私政策》

 11  1/2 12››
 
需要登录并加入本群才可以回复和发新贴
打印 | 推荐 | 订阅 | 收藏

标题:【求助】PCR新手不懂，请求高手解答。。。

gmjghh[使用道具]
三级
Rank: 3Rank: 3


UID 75184
精华 0
积分 475
帖子 589
信誉分 100
可用分 3823
专家分 0
阅读权限 255
注册 2011-10-20
状态 离线
1

发表于 2015-4-2 10:58 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

【求助】PCR新手不懂，请求高手解答。。。


pcr条带出现引物二聚体，目的条带没有出现。什么原因呢？怎样才能避免啊？
请教高手，谢谢了~~~
顶部
kulee[使用道具]
四级
Rank: 4


UID 77361
精华 0
积分 615
帖子 849
信誉分 100
可用分 5127
专家分 0
阅读权限 255
注册 2011-11-16
状态 离线
2

发表于 2015-4-2 10:58 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

可能是退火温度太低吧
顶部
bs4665[使用道具]
四级
Rank: 4


UID 75127
精华 0
积分 505
帖子 650
信誉分 100
可用分 4136
专家分 0
阅读权限 255
注册 2011-10-19
状态 离线
3

发表于 2015-4-2 10:59 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

1.保证模板的质量，2.如果质量是好的，提高退火温度，主要是这两个原因吧
顶部
whitesheep[使用道具]
四级
Rank: 4


UID 78856
精华 0
积分 825
帖子 1330
信誉分 100
可用分 7476
专家分 0
阅读权限 255
注册 2011-12-4
状态 离线
4

发表于 2015-4-2 10:59 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
学习，我的也有这种情况，不过目的条带也是有滴，试一下提高退火温度。
顶部
u234[使用道具]
四级
Rank: 4


UID 77031
精华 0
积分 691
帖子 1081
信誉分 100
可用分 6196
专家分 0
阅读权限 255
注册 2011-11-12
状态 离线
5

发表于 2015-4-2 10:59 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

可能是因为引物特异性不够强，原因有很多，慢慢排除吧！good luck！
顶部
toy[使用道具]
四级
Rank: 4


UID 77357
精华 0
积分 716
帖子 1052
信誉分 100
可用分 6165
专家分 0
阅读权限 255
注册 2011-11-16
状态 离线
6

发表于 2015-4-2 11:00 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

我也有这种情况，重复了两次了，一开始退火温度58℃，后来又做了一个60℃的，都只有引物二聚体
顶部
xingyi08[使用道具]
三级
Rank: 3Rank: 3


UID 76899
精华 0
积分 496
帖子 671
信誉分 100
可用分 4201
专家分 0
阅读权限 255
注册 2011-11-10
状态 离线
7

发表于 2015-4-2 11:00 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
最主要的是可能引物特异性不好吧？重新设计引物试试看了额
顶部
woshiduiyan[使用道具]
三级
Rank: 3Rank: 3


UID 108875
精华 1
积分 207
帖子 89
信誉分 102
可用分 1154
专家分 10
阅读权限 255
注册 2013-5-15
状态 离线
8

发表于 2015-4-2 11:00 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

降低引物浓度，增加模板浓度试试呀？
顶部
wanglaoshi[使用道具]
三级
Rank: 3Rank: 3


UID 77295
精华 0
积分 449
帖子 597
信誉分 100
可用分 3796
专家分 0
阅读权限 255
注册 2011-11-15
状态 离线
9

发表于 2015-4-2 11:00 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

引物结构不好吧，特异性也不高，大概是这样吧
顶部
zhy平平[使用道具]
三级
Rank: 3Rank: 3


UID 114517
精华 0
积分 291
帖子 282
信誉分 100
可用分 2163
专家分 0
阅读权限 255
注册 2013-9-25
状态 离线
10

发表于 2015-4-2 11:04 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
影响结果的因素太多了~~哎，实验难做啊
顶部
 11  1/2 12››