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标题:【求助】 cDNA-AFLP变性丙烯酰胺凝胶电泳,条带少不清楚

泉水叮咚[使用道具]
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【求助】 cDNA-AFLP变性丙烯酰胺凝胶电泳,条带少不清楚


最近刚上大板,跑出来这样的条带,帮忙看看!什么原因啊?


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2015-4-2 19:37
ȫ1.jpg (111.21 KB)
 
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泉水叮咚[使用道具]
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最右边的是Marker,拖带, 条带少,不整齐,清楚,

问师兄,说可能是胶做得不好,显影时弄得不好,用得试剂甲醛是很久以前的了,

还有可能是电泳仪器的问题,有些旧了,之前有几个同学做得也不大好!

预电泳是50W,30min

正式电泳是40W,2h,电压是2000多V


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viviwang1987[使用道具]
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感觉是PCR结果不是很理想吧
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有没有预扩增的图片?
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把预扩增的图片发来看一下啊。
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viviwang1987[使用道具]
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注意醋酸钠的质量,要买质量好的。
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泉水叮咚[使用道具]
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预扩图,感觉不是很弥散,有条带,但片段不大,最左边的是Marker


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2011-10-25预扩2.jpg.jpg (12 KB)
 
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泉水叮咚[使用道具]
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QUOTE:
原帖由 viviwang1987 于 2015-4-2 19:41 发表 bbcodeurl('http://bbs.antpedia.com/images/common/back.gif', '%s')

注意醋酸钠的质量,要买质量好的。

用的是无水碳酸钠,价格好像是挺便宜的,国产的
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bring[使用道具]
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应该是PCR产物的问题啊!
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泉水叮咚[使用道具]
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QUOTE:
原帖由 bring 于 2015-4-2 19:43 发表 bbcodeurl('http://bbs.antpedia.com/images/common/back.gif', '%s')

应该是PCR产物的问题啊!

酶切没切好吗?
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