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标题:【讨论帖】 求分析

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发表于 2015-4-2 20:39 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

【讨论帖】 求分析

做pcr，4个样品 从左到右。 前两个为b-actin 。后面两个 由上至下第二条是目的条带。条件是94-59-94；25个循环。请大家分析分析 怎么样才能清楚的得到目的条带呢？ 谢谢：）


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2015-4-2 20:39
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发表于 2015-4-2 20:39 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

用PCR得到的产物做模板继续PCR，也就是二次PCR 就能得到量大的目的条带了。
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发表于 2015-4-2 20:40 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

94-59-94?
延伸温度是94？什么酶？
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发表于 2015-4-2 20:41 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大


QUOTE:
原帖由 remonte 于 2015-4-2 20:39 发表 bbcodeurl('http://bbs.antpedia.com/images/common/back.gif', '%s')

用PCR得到的产物做模板继续PCR，也就是二次PCR 就能得到量大的目的条带了。

继续做PCR是指？我刚开始做 不知道 是指你们说的回收么？能详细点告诉我么 谢谢了啊
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发表于 2015-4-2 20:42 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
哦哦 说错了，是72 不好意思
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发表于 2015-4-2 20:42 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

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发表于 2015-4-2 20:43 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
继续做PCR是指？我刚开始做 不知道 是指你们说的回收么？能详细点告诉我么 谢谢了啊

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二次PCR就是用上次PCR的产物做模板，再次PCR
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 小中大

挖胶回收有试剂盒。可以参考试剂盒说明书做。
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发表于 2015-4-2 20:43 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

回收后的产物作为模板再进行PCR。ＰＣＲ反应可以增至35个循环。
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发表于 2015-4-2 20:44 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

可以提高退火温度，减少杂带的产生！二次pcr很容易发生突变的！
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