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标题:[未解决]水中氰化物吸光度,两条曲线的斜率不一样?

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ztj970831[使用道具]
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水中氰化物吸光度,两条曲线的斜率不一样?

最近做水质中的氰化物分析,采用的是异烟酸-巴比妥酸分光光度法,同一台仪器,在两个不同的实验室,不同的厂家的试剂,做两条标准曲线,
A标准曲线:100ppb的氰化物吸光度分别是0.7,零点的吸光度数值是0.002
B标准曲线:100ppb的氰化物吸光度分别是0.2,零点的吸光度数值是0.07左右
两条曲线的斜率不一样,各位做氰化物分析的坛友,谁能解释一下,造成吸光度不同的原因有哪些?
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dxkuii[使用道具]
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试剂浓度不一样、操作步骤不一样、同一台仪器的使用倍率不一样、比色皿的规格不一样都可以导致吸光度的不一样
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kcuw589[使用道具]
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实际反映的是仪器灵敏度的问题,注意查看倍率是否一致,尤其是光源的光强度不同,必然会导致灵敏度的较大差异,灯用的时间久了,亮度降低,灵敏度就降低,标准曲线的斜率就小,零点的A就增大(这样理解吧,若把工作曲线较低浓度的某点定为“翘翘板”的支点,你让板放平一点,低端翘高,高端降低,当然,不一定恰当哦!)
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ztj970831[使用道具]
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4
 
光源强度不变,比色光程不变。

试剂的浓度都是一样的,但是试剂是不同厂家的试剂。操作步骤没有变化,比色的光程是不变的,还有其他的原因能引起吸光度的变化吗?

两次试验用的仪器是同一台,分析方法也是一样的。不一样的就是试剂厂商不一样,也都是国产试剂。
本人疑惑的是会不会由于试剂存放时间的差异,或是不同厂商的试剂纯度的差异,给试验结果的吸光度造成较大的差异?
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kcuw589[使用道具]
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我觉得你应该逐项地用对照实验来检验是或否(是不是它的影响),例如,在不同实验室中的比色皿必须用同一对(不同实验室测定时都用甲实验室提供的一对固定的比色皿),现象依旧,排除它的影响。我总觉得仍然是仪器的问题,建议先检验仪器的灵敏度:可采用其他显色体系,例如配一份高锰酸钾溶液,因为它不需加任何显色试剂,其他试剂影响可略,放在甲实验室中测定后,再送到乙实验室测定(当然是时间很接近了,放置过夜肯定不行),所有参数和条件相同,如果 A相同或很相近,应该不是仪器的问题,反之就可能是仪器的问题了;要检验试剂的问题:在同一台仪器上,分别用两瓶同种试剂(怀疑对象和新购)来配制标准溶液(浓度、条件均相同,只是怀疑的试剂不相同),如果测出的结果有明显差别,那就是试剂的问题,否则就不是试剂问题。试剂问题一般是部分失效和含空白高的问题,前一种情况可能导致显色不完全(相当于显色剂不足),一种可能的现象是标准曲线性差,出现向下弯曲,如果失效成分也产生吸收的话,标准曲线线性变化不大,会系统偏高(相当于叠加了一个空白值),用了试剂空白应该可以扣除的;如果是后一情况,同样使试剂空白系统偏高,应该不会出现“翘翘板”的变化特点。再试试吧。
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xiaoweiwe121[使用道具]
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A仪器灵敏度高,试剂和空白较为纯净,干扰少;B仪器空白值太大了,需查找原因
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ttkl533[使用道具]
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因为用的同一台仪器,所以可以排除仪器造成差异的可能;
   由于是在两个不同的实验室,因此存在操作细节上的差异,尤其是蒸馏和发色(显色)环节最容易产生大的误差;再次是试剂配置质量,如磷酸盐缓冲溶液,如pH过低或过高(最好在6.8-7.0)都建会造成结果偏低。
   再就是不同的厂家的试剂,尤其是氯氨T质量很关键,其次是巴比妥酸实际有效含量的高低(影响到摩尔吸光系数的大小),质量不好势必造成结果严重偏低。
    顺便说一下,你的100ppb的氰化物是如何得来的?严格按标准方法,标准曲线最高的点是5微克,正常的吸光度在0.7-0.8,校准曲线斜率应在0.14-0.16。
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ztj970831[使用道具]
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我做的100ppb氰化物(相当于0.1mg/L)是用标准品稀释到100ppb的.
国标方法的最高点是将5mL的1.00mg/L氰化物标准液稀释到25mL(相当于0.2mg/L),您所说的5微克是什么意思?请指教了?呵呵
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