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标题:【求助】细胞大面积的出现未知小黑碎片

xevin[使用道具]
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消化过了也可能会出现黑点,或者使用的细胞瓶洗的不干净也有可能造成黑点吧
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箭头儿[使用道具]
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应该问题不大,离心,用培养基洗涤一下,效果不错,我试过
极可能是你细胞生长分泌的东西

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先谢谢您的解答!请问减速离心该怎么做?是先消化下来再直接用低速(不大于1000)离心呢?还是从较高转速(1300)往下降的梯度离心??
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QUOTE:
原帖由 xevin 于 2015-4-7 14:52 发表 bbcodeurl('http://bbs.antpedia.com/images/common/back.gif', '%s')

消化过了也可能会出现黑点,或者使用的细胞瓶洗的不干净也有可能造成黑点吧

应该不会是消化过了或瓶子的问题,因为我铺的板子也由这样的情况~消化的时候都会采用两步法消化,轻轻拍打细胞瓶待胰酶变的比较浑浊时就马上终止。
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是否是酒精灯上的小黑块通过一些途径(比如你你盖上瓶子前,把瓶口放到火焰附近烧)飘到瓶子里去了

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先行谢过!应该不会是那样,以前遇到过你说的那种情况,不过换液时多洗几次就好的多,但是这次却洗不掉!
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vcve[使用道具]
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问题不大,你这个问题我在培养细胞的时候也出现过,细胞仍可以生长的很好,确切的原因还不知道,,但估计是不是你的血清反复冻融过。
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ns5fan[使用道具]
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你的血清用之前是不是灭活过?
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ns5fan[使用道具]
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查资料发现血清用之前灭活对细胞的作用不大,反而会在一定程度上影响细胞生长,37℃放置一段时间会有你说的这种情况。
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箭头儿[使用道具]
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QUOTE:
原帖由 ns5fan 于 2015-4-7 14:54 发表 bbcodeurl('http://bbs.antpedia.com/images/common/back.gif', '%s')

你的血清用之前是不是灭活过?

这个就不知道了!这是老板买回来的!这样影响会很大吗??
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箭头儿[使用道具]
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应该不是黑胶虫!!黑胶虫是会动的啊!!
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ukonptp[使用道具]
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实验显示,经过正确处理的热灭活血清,对大多数的细胞而言是不需要的。经此处理过的血清对细胞的生长只有微小的促进,或完全没有任何作用,甚至通常因为高温处理影响了血清的质量,而造成细胞生长速率的降低。而经过热处理的血清,沉淀物的形成会显著的增多,这些沉淀物在倒立显微镜下观察,像是 "小黑点",常常会让研究者误以为是血清遭受污染,而把血清放在37C环境中,又会使此沉淀物更增多,使研究者误认为是微生物的分裂扩增。
  因此建议您,若非必须,您可以不需要做热处理这一步。如此一来,不但节省您宝贵的时间,更确保您血清的质量!另外,购买已灭活成品也不失一个捷径,请在购买的时候注意询问厂家是否是已灭活血清。
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