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标题:【求助】细胞大面积的出现未知小黑碎片

箭头儿[使用道具]
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发表于 2015-4-7 14:59 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大


QUOTE:
原帖由 caihong 于 2015-4-7 14:59 发表 bbcodeurl('http://bbs.antpedia.com/images/common/back.gif', '%s')
问题不大，你这个问题我在培养细胞的时候也出现过，细胞仍可以生长的很好，确切的原因还不知道，，但估计是 ...

...

hehe !谢谢你哈！我试一试传一下！在多洗几遍！
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junhun[使用道具]
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发表于 2015-4-7 15:00 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
我养的细胞近来也出现了这种情况，但是小黑点没楼主的多，我的感觉是，如果细胞没有污染，几乎可以确定为细胞碎片，而且传代还是有，是因为细胞状态不好的缘故，建议消化时间不要过长，因为碎片比较容易消化下来，一定时间后，直接将胰酶吸去，此时碎片大多数被吸走了，而后用新鲜配液将细胞吹下，直接种板，可不离心了（因为离心本来就是为了除去胰酶和一些死细胞），我试过，效果不错！
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发表于 2015-4-7 15:00 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大


QUOTE:
原帖由 junhun 于 2015-4-7 15:00 发表 bbcodeurl('http://bbs.antpedia.com/images/common/back.gif', '%s')
我养的细胞近来也出现了这种情况，但是小黑点没楼主的多，我的感觉是，如果细胞没有污染，几乎可以确定为细胞碎片，而且传代还是有，是因为细胞状态不好的缘故，建议消化时间不要过长，因为碎片比较容易消化下来，一定时间后，直接将胰酶 ...

xiexie ，昨天传了一下！采用朋友们建议的低速离心， 并且传代后12小时再洗了一次！现在好多了哈！应该不是污染哈！呵呵！以后还请多多交流！
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summerxx[使用道具]
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发表于 2015-4-7 15:01 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
应该问题不大，离心，用培养基洗涤一下，效果不错，我试过
极可能是你细胞生长分泌的东西

======================================

应该没什么问题，对细胞生长没有哦太大影响
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woshi[使用道具]
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发表于 2015-4-7 15:01 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

我在培养细胞时也出现过类似的情况！估计是胰酶消化细胞不充分造成的！你可以在细胞重新分板时，先用胰酶消化，之后用PBS洗涤细胞1-2次，再用培养基培养！
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bring[使用道具]
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发表于 2015-4-7 15:02 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

虽然楼主问题解决，但我还是冒点杂音，希望对以后的童鞋有帮助。

第一，不是黑胶虫，黑胶虫会动，镜下形态是规则圆点或逗号形状。黑胶虫会影响细胞形态，形状大致不变但细胞大小比正常偏小，因为黑胶虫是血清里带来的，是竞争血清营养的东西。
第二，你这个是细胞由于传代次数过多或者胰酶消化时间过长造成的细胞代谢不良，细胞的分泌物。解决这个问题，把细胞保种冻到-80°C冰箱一个礼拜，或者放液氮里。然后复苏，问题就可解决。
P.S.我做细胞方面的实验已经4年多了，你的这个问题以前也多次遇到，后来发现，细胞也需要呵护，才长的好，哈哈。
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发表于 2015-4-7 15:02 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大


QUOTE:
原帖由 bring 于 2015-4-7 15:02 发表 bbcodeurl('http://bbs.antpedia.com/images/common/back.gif', '%s')

虽然楼主问题解决，但我还是冒点杂音，希望对以后的童鞋有帮助。

第一，不是黑胶虫，黑胶虫会动，镜下形态是规则圆点或逗号形状。黑胶虫会影响细胞形态，形状大致不变但细胞大小比正常偏小，因为黑胶虫是血清里带来的，是竞争血清 ...

非常感谢您的解答！这个问题目前来看也没有完全解决，这几天观察依然有类似情况出现，只是没有那么厉害就是了！今天测量了一下培养基的PH值，发现居然是8.2几，吓了一跳，个人觉得PH值才是产生这个问题的根本原因，同时也认为细胞到目前为止还没有挂，确实是有点不容易~今天已经调整过来了，再等等看结果吧！希望它平安健康！最后请问一下，培养基过滤后的PH值会升高吗？？
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abc816[使用道具]
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发表于 2015-4-7 15:02 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

我的细胞也遇到了同样的情况，换液时用PBS洗了，但还是会有，求解
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remenb[使用道具]
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发表于 2015-4-7 15:03 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

得，肯定是污染 了。
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箭头儿[使用道具]
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 小中大


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原帖由 remenb 于 2015-4-7 15:03 发表 bbcodeurl('http://bbs.antpedia.com/images/common/back.gif', '%s')

得，肯定是污染 了。

污染的不是啊！这因为培养基变碱了！导致细胞状态很差，最后破裂成的碎片照成的！！！
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