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标题:[未解决]样品预处理用沉淀蛋白,柱压飙升到快1900psi怎么冲才能干净

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santa[使用道具]
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样品预处理用沉淀蛋白,柱压飙升到快1900psi怎么冲才能干净

前几天样品预处理用的是沉淀蛋白,今天150mm的柱子,80%甲醇,柱压飙升到快1900psi,是不是柱子里面有蛋白了呀?该怎么冲才能干净呀?各位高手请支支招吧!!!
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fence-straddler[使用道具]
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回复 #1 santa 的帖子

“样品预处理用的是沉淀蛋白”就是说进液相的样品里可能含有无机盐或者是未沉淀完全的蛋白分子?样品用什么溶解的?进样前样品过滤了吗?过滤是不容易发生这种情况的!

如果真是蛋白堵的,我认为别无别无它法,只能试试用低流速的乙腈反冲一下柱,当然要抱着柱子可能报废的准备了!
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先用甲醇水冲过夜试试,还没有改善的话再低流速反冲下试试。下次最好接个预柱!祝好运
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santa[使用道具]
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4
 
我有用预柱的,甲醇水也有冲,柱压还是很高,是不是有蛋白进到柱子里了呀?还有,柱子可以反着冲嘛?我看柱子的使用说明上有写柱子“尽可能不反冲”。
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英语你我他[使用道具]
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用95%水-5%甲醇来冲 如果实在不行的话 就把筛板拆下来用异丙醇超声处理 然后再上回去就是了 但愿对你的柱子能行的 反正我们以前拆筛板来超声后效果还是很明显的
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haohaorenjia[使用道具]
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柱子应该没问题
你把柱子卸了看看光保护柱压力有多少
如果保护柱压力高了,单独处理这个就行
将柱芯反装,用甲醇冲,一般都会解决
之后再装回原来的状态,看看压力
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感悟人生[使用道具]
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预柱的柱芯换了吗?由预柱应该不至于。换柱芯压力还高?
尽量不要反冲,实在没辙了,反冲一下应该会有用。试试吧。
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haohaorenjia[使用道具]
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楼主用的是什么牌子的色谱柱?有些柱子可以反冲有些不可以的。
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